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目的 了解问号钩端螺旋体(Leptospira interrogans)脂多糖(lipopolysaccharide,L-LPS)诱生人单核细胞或小鼠单核-巨噬细胞产生炎性细胞因子的作用以及问号钩端螺旋体感染小鼠内脏组织中外周血单核-巨噬细胞浸润的情况。方法采用酚水法提取问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株L-LPS,分别用LPS定量试剂盒和鲎试验试剂盒测定L-LPS浓度和内毒素活性。采用人或小鼠细胞因子抗体芯片,检测人THP-1单核细胞或小鼠J774A.1单核-巨噬细胞受L-LPS作用或被问号钩端螺旋体赖株感染24或48 h后产生细胞因子情况。采用小鼠细胞因子抗体芯片检测问号钩端螺旋体赖株感染C3H/HeJ小鼠血清细胞因子。以兔抗小鼠外周血单核-巨噬细胞特异性CD68-IgG为一抗、HRP标记驴抗兔IgG为二抗,采用免疫组化法检测C3H/HeJ小鼠感染问号钩端螺旋体赖株5、7或10 d后肺、肝、肾组织中外周血来源的CD68+单核-巨噬细胞的浸润情况。结果1×109问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株可提取约1μ的L-LPS。L-LPS凝固鲎试剂所需最低浓度为0.5 ng/mL,为大肠埃希菌脂多糖(E-LPS)活性1/5(0.1 ng/mL)。L-LPS作用THP-1细胞24或48h后有29种细胞因子水平显著升高,其中嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子(1-309)、白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-6、IL-12p40、单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)、肿瘤坏死因子--α(TNF-α)和干扰素γ诱导单核因子(MIG)10种细胞因子水平升高5倍以上(p<0.01),eotaxin-2、IFN-γ、IL-3、IL-10、IL-11、IL-12p70、MCP-1、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、G-CSF、IL-1β、IL-7、IL-13、IL-15、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、M-CSF、MIP-1δ、TGF-β1、可溶性 TNF 受体Ⅰ(sTNFRI)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)19种细胞因子水平升高1.5～<5倍(p<0.05)。L-LPS作用J774A.1细胞24或48h后有9种细胞因子水平升高,其中G-CSF、IL-6、IL-10、TNF-α、T细胞和单核及嗜酸性粒细胞CC亚族趋化因子(RANTES)5种细胞因子水平升高5倍以上(p<0.01),MCP-1、IL-12p40、IL-1β和可溶性TNF受体Ⅱ(sTNFRⅡ)4种细胞因子水平升高升高1.5～<5倍(p<0.05)。问号钩端螺旋体赖株感染细胞上清以及问号钩端螺旋体赖株感染小鼠血清中细胞因子检测结果与上述L-LPS作用细胞相似。问号钩端螺旋体赖株感染C3H/HeJ小鼠5 d后肺、肝和肾组织中出现CD68+单核-巨噬细胞浸润,感染7或10d时上述组织内CD68+单核-巨噬细胞数量不断增加,肺和肾组织出现结构模糊、细胞裂解等组织破坏现象。结论L-LPS具有很强的诱导单核-巨噬细胞上调多种炎性细胞因子和单核-巨噬细胞趋化因子表达的作用,其中IL-6和TNF-α为主要炎性细胞因子,问号钩端螺旋体感染小鼠内脏组织中有大量单核-巨噬细胞浸润。