【摘 要】
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目的 为提高Y染色体遗传标记的个人识别能力和非父排除能力,建立Y-STR的复合扩增技术和新一代遗传标记Y-SNP的检测方法十分必要。本课题旨在构建九个Y-STR基因座的复合扩增检
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目的 为提高Y染色体遗传标记的个人识别能力和非父排除能力,建立Y-STR的复合扩增技术和新一代遗传标记Y-SNP的检测方法十分必要。本课题旨在构建九个Y-STR基因座的复合扩增检测体系,以期为法医Y-STR分型提供新的技术手段。建立多重Y-SNP单碱基引物延伸反应,掌握多重单碱基引物延伸反应的一般规律,为高通量分析Y-SNP提供基础。方法选定9个Y-STR基因座,应用加尾引物设计策略,构建9个基因座的Y-STR复合扩增荧光检测体系。依据DNA分析技术工作组(TWGDAM)指南进行法医学可行性研究和群体遗传学研究。选定3个Y-SNP,设计PCR引物和延伸引物,建立3个Y-SNP的多重单碱基引物延伸反应。利用在完全变性条件下HPLC对DNA片段的分析是按其长度和序列进行分离的原理,建立3个Y-SNP复合检测方法。并进行法医学可行性研究和群体遗传学研究。结果构建了9个Y-STR基因座:DYS434、GATA-A10、DYS438、DYS439、DYS531、DYS557、DYS448、DYS456,DYS444复合扩增检测体系(HY-9-plex)。法医学可行性研究结果显示,敏感度检验最低模板量HY-9-plex体系为0.5ng;分型结果稳定,重复性好,能够对常见基质上的斑痕正确分型,具有很好的组织同一性、种属特异性,可以耐受高女性成分的干扰,用于混合斑分析具
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