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目的：通过大鼠肝星状细胞与大鼠巨噬细胞间直接接触与非接触共培养，观察细胞间连接对大鼠肝星状细胞活化的影响。方法：1.分组：采用S-D大鼠，用原位胶原酶、蛋白酶序贯灌注法分散细胞，再采用密度梯度离心法分离得到肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)。用transwell培养系统实现非接触共培养。分组：A组：将大鼠肝星状细胞以0.5×10~5个/ml，1ml接种于transwell培养系统的小室，将大鼠巨噬细胞以3.0×10~5个/ml,2ml接种于transwell培养系统的大室；B组：将大鼠肝星状细胞和大鼠巨噬细胞按A组的细胞数量比混匀后，分别于小室加1ml，于大室加2ml；C组：将巨噬细胞以3.0×10~5个/ml,2ml接种于transwell六孔板的大室中。D组：将大鼠肝星状细胞以0.5×10~5个/ml,2ml接种于transwell培养系统的大室，将大鼠巨噬细胞以3.0×10~5个/ml,1ml接种于transwell培养系统的小室；E组：将大鼠肝星状细胞和大鼠巨噬细胞按C组的细胞数量比混匀后，分别于小室加1ml，于大室加2ml；F组：将大鼠肝星状细胞以0.5×10~5个/ml,2ml接种于transwell培养系统的大室。2.观察指标：○1HSC的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），用免疫细胞化学法。2细胞上清液中的Ⅰ型胶原、转化生长因子-β1（TGF-β1)、血小板衍化生长因子(PDGF)的分泌量，用酶联免疫吸附法（ELISA）。3细胞的增殖情况，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法。3.统计方法:多个样本均数的比较采用one-way ANOVA，多个样本均数的两两比较采用LSD法检验, P＜0.05为在统计学上有显著差异。结果：1.A、B、D、E、F组肝星状细胞的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性表达。2.细胞上清液中的Ⅰ型胶原： A组：36.364±1.892ng/ml； B组：23.502±1.474ng/ml；C组：10.293±1.724ng/ml；D组：42.331±2.701ng/ml；E组：31.337±0.792ng/ml；F组：35.544±0.907ng/ml；B组含量小于A组，E组含量小于D组，差异有统计学意义(P <0.05)，即巨噬细胞和星状细胞直接接触的共同培养组I型胶原含量比巨噬细胞同星状细胞非接触共培养组明显少；细胞上清液中的转化生长因子-β1（TGF-β1):A组:301.115±15.448pg/ml;B组：406.182±19.224pg/ml;C组：265.140±10.521pg/ml；D组：383.555±9.246pg/ml；E组：435.356±5.842pg/ml；F组：279.726±8.517pg/ml；细胞上清液中的血小板衍化生长因子(PDGF)：A组：67.916±4.830pg/ml；B组：77.838±4.014pg/ml；C组：60.034±5.677pg/ml；D组：87.678±3.643pg/ml；E组：95.189±1.672pg/ml；F组：65.646±2.032pg/ml；B组中2种细胞因子含量均大于A组，E组中2种细胞因子含量均大于D组，差异有统计学意义(P <0.05)，即巨噬细胞和星状细胞直接接触的共同培养组PDGF和TGF-β1的量比巨噬细胞同星状细胞非接触共培养组明显升高；3.细胞于transwell培养系统培养48h后行MTT检测所得的OD值：A组：0.63±0.02；B组：0.34±0.02；C组：0.38±0.01；D组：0.72±0.08；E组：0.30±0.01；F组：0.48±0.05；B组小于A组，E组小于D组，差异有统计学意义(P <0.05)，即在起始细胞数量相同条件下，培养48h后巨噬细胞和星状细胞直接接触的共同培养组的细胞数量比巨噬细胞同星状细胞非接触共培养组少；结论：1.巨噬细胞与肝星状细胞之间的直接接触可使PDGF和TGF-β1的分泌量明显升高。2.巨噬细胞与肝星状细胞之间的直接接触可使I型胶原的分泌量明显减少。3.本实验未能完全证实巨噬细胞与肝星状细胞之间的直接接触对HSC的活化有促进作用。