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肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)是一类位于肿瘤间质的原发或继发于肿瘤组织周围的淋巴细胞,主要由T细胞构成,还有少量的B细胞和NK细胞.该文采用该方法从18例病人的直肠癌和结肠癌组织标本中扩增得到了较高纯度的αβTILs细胞系和γδTILs细胞系,并对扩增所得的细胞进行了肿瘤细胞毒、细胞增殖等多方面的研究.VEGF是肿瘤组织中血管生成的主要起始因素,与新生血管程度直接相关,并在实体肿瘤的侵袭和转移中起到一定的作用.目前关于γδT细胞的识别配体有许多假说,热休克蛋白(HSP)70分子是其中之一.在该实验中研究人员首先应用细胞免疫组化、免疫荧光染色(FACS)及Western-Blot实验证实了Daudi细胞膜上能够高表达HSP70分子,然后提取细胞膜成分,用去垢剂处理得到增溶的膜蛋白后,应用ADP-agarose层析柱纯化细胞膜HSP分子.为了更深一步研究HSP分子对γδT细胞的刺激作用,研究人员将静息化的γδT细胞与分别含有9ug/ml穿透液蛋白、HSP70分子、HSP70-多肽复合物分子的培养基共孵育,测定三种情况下蛋白刺激细胞增殖的能力.研究人员应用分子生物学技术对扩增所得的对照组细胞和HSP70-肽复合物刺激细胞进行了δ1,δ2,δ3亚型的分析.应用半定量PCR方法,将各亚群与看家基因β-actin进行竞争性PCR.综上所述,该文用抗体固相扩增手段获得了多株人类结肠癌和直肠癌细胞αβTIL细胞系和γδTIL细胞系,并获得了较为详尽的γδTIL细胞系的功能资料.