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马铃薯(Solanum tuberosum L.)是世界上第四大粮食作物,具有丰富的野生资源。马铃薯青枯病是由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的毁灭性土传病害。目前的马铃薯栽培种中没有发现高抗青枯病的材料,而少数具有抗性或耐性的野生种及原始栽培种又与普通栽培种存在杂交障碍。体细胞杂交技术为利用这些野生种和原始栽培种资源中的青枯病抗性基因提供了新方法。本研究旨在通过抗青枯病的马铃薯二倍体野生种S. chacoense和二倍体杂交群体后代BW2与优良双单倍体栽培种DH1、DH3和DH4的原生质体融合进行优良性状重组,创制抗青枯病的四倍体马铃薯新种质。主要研究结果如下：1.共配制融合组合6个,BW2与双单倍体栽培种融合的3个组合共形成1432个愈伤组织,未分化出再生植株,而S. chacoense与双单倍体栽培种融合的3个组合共形成144个愈伤组织,分化出20个再生植株,表明基因型对愈伤组织的形成和植株再生有影响。2.将20个再生株系经RAPD和ISSR标记鉴定,有11个株系为真正的体细胞杂种,杂种植株的比例为55%,其余9个株系为野生种亲本S. chacoense的再生类型。用流式细胞仪分析再生植株的倍性水平,结果表明,11个体细胞杂种中,有8个为六倍体,另外四倍体、七倍体、混倍体各有1个。3.对11个体细胞杂种株系进行胞质分析,结果表明,有7个株系发生了细胞质的重组,占杂种株系的63.6%。11个体细胞杂种中,有10个为野生种亲本S.chacoense的叶绿体类型；6个体细胞杂种为栽培种亲本的线粒体类型,3个为野生种亲本的线粒体类型,还有2个体细胞杂种同时融合有双亲的线粒体。4.利用青枯菌生理小种1号菌株对体细胞杂种及其亲本的试管苗进行伤根接种,方差分析结果表明,所有体细胞杂种的青枯病抗性均显著高于双单倍体亲本,其中有3个株系表现出比野生种亲本S. chacoense更强的抗病性,6个株系的抗性水平与S. chacoense没有显著差异,另外2个株系的抗性介于融合双亲之间。