一枝黄花叶精油化学成分与诱食杀虫抑菌活性研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:szj188
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一枝黄花(Solidago.Decurrens Lour.)是中国特有的中药物种,但其精油未见研究报道。本课题针对化学农药和化学饲料添加剂安全问题较多,生物农药和生物饲料添加剂日益重要的现状,开展一枝黄花叶精油化学成分及其对雏鸡诱食活性和杀虫抑菌活性的研究。1.一枝黄花叶精油化学成分分析。采用水蒸气蒸馏法提取一枝黄花(Solidago decurrens Lour.)鲜叶中的挥发油,得油率为0.41%。采用GC-MS分析其化学成分,鉴定出47种化合物,占总离子流出峰面积的90.31%。一枝黄花叶挥发油中含有相对含量较高的榄香烯化合物。2.一枝黄花叶精油对茶树病虫及其它病虫的生物活性。采用浸叶法和浸虫浸叶法测定其杀虫杀螨活性,结果:对斜纹夜蛾、二十八星瓢虫的死亡率小于50%;对豆叶螨、茶黄螨死亡率小于80%。采用抑菌环法及生长速率法测定其对病原细菌、真菌的抑制作用,结果:一枝黄花叶精油对细菌的抑制作用中等至低,对真菌的抑制作用低。结论:一枝黄花叶精油对茶树病虫及其它病虫的生物活性不高。3.一枝黄花叶精油对雏鸡的诱食活性研究。熏蒸法测定结果:在熏蒸后的30和60分钟,在精油(EO)处理浓度0-100μl范围,采食量随着浓度的增大而增大。腹腔注射法测定结果:相对低剂量的精油(0.5×10-3ml/ml)在30,60,90和120分钟显著地促进采食。侧脑室微注射(ICV)法测定结果:在90和120分钟,相对低剂量的精油(1×10-3ml/ml)处理显著地促进采食。相对高剂量的精油(1×10-2ml/ml)处理显著地抑制累计步移。精油ICV注射对雏鸡下丘脑中相关基因表达的影响,实时荧光定量PCR测定结果:相对低剂量的精油处理对3个促进采食的基因NPY、Y1、Y5的表达都有促进作用;而相对高剂量的精油处理对Y5基因和抑制采食的POMC基因表达有促进作用,对Y1、NPY基因的表达还有抑制作用。雏鸡采食量与5个基因的表达量相关。结论:采用3种方法探明了一枝黄花叶精油对雏鸡具有诱食活性,并且这种诱食作用有一定的剂量范围。从分子水平揭示了一枝黄花叶精油的诱食作用与调节采食的基因NPY、Y1、Y5、POMC、GLP-1的表达量相关。4.一枝黄花叶精油榄香烯的分离。采用硅胶柱层析分离方法,从一枝黄花叶精油中分离主要成分δ-榄香烯,结果从30ml一枝黄花叶精油分离得到相对含量为70.21%的δ-榄香烯样品5ml。并分离获得二羟基苯甲醛。5.榄香烯对雏鸡的诱食活性研究。熏蒸法测定结果:β-elemene处理在熏蒸后30分钟内采食量随着浓度的增长而增长。δ-elemene处理在熏蒸作用后的30和60分钟,在0-25μl的浓度范围,采食量随着浓度的增大而增大。腹腔注射法测定结果:β-elemene1(1×10-3ml/ml)在60,90和120分钟能显著地增进采食;β-elemene2(1×10-4ml/ml)在90分钟显著地增进采食。δ-elemene1(1×10-3ml/ml)在试验全期都能显著地增进采食。侧脑室微注射(ICV)法测定结果:β-elemene1(2×10-3ml/ml)、β-elemene2(2×10-4ml/ml)和δ-elemene1(2×10-4ml/ml)在90和120分钟能显著地增进采食。β-elemene1,2处理都能显著地刺激步移。δ-elemene组仅δ-elemene 1处理能显著地增强累计步移距离。β-elemene和δ-elemene处理对啄食频率都没有显著影响。榄香烯ICV注射对雏鸡下丘脑相关基因表达的影响,检测结果:β-elemene2处理对NPY、Y1、Y5基因的表达有显著促进作用。β-elemene1处理仅对Y1基因有显著促进作用,对NPY、Y5基因的表达反而有抑制作用。δ-elemene1处理对NPY、Y1、Y5基因的表达有显著促进作用。δ-elemene2处理对Y5基因及抑制采食的POMC、GLP-1基因的表达有显著促进作用,而对Y1、NPY基因的表达有抑制作用。雏鸡采食量与5个基因的表达量相关。结论:探明了δ-榄香烯及β-榄香烯对雏鸡具有诱食作用;并且这种诱食作用有一定的剂量范围。从分子水平揭示了榄香烯的诱食作用与调节采食的基因NPY、Y1、Y5、POMC、GLP-1的表达量相关。
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