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目的:通过构建瑞芬太尼致痛觉过敏和切口痛模型,观察持续泵注瑞芬太尼后不同时间小鼠的疼痛行为变化,并检测小鼠腰段脊髓水通道蛋白4(aquaporin‐4,AQP-4)、谷氨酸转运体1(Glutamate transporter‐1,GLT-1)和连接蛋白43(Connexin43,Cx43)的表达,以探讨AQP-4参与瑞芬太尼诱发痛觉过敏的可能机制。方法:将24只CD1小鼠按照随机数字表法分成4组,对照组(C组):皮下泵注生理盐水0.8m L/h;切口痛组(I组):左后爪建立切口痛模型的同时,皮下泵注生理盐水0.8m L/h;瑞芬太尼组(R组):皮下泵注瑞芬太尼80μg/kg(0.8m L/h,采用生理盐水溶解);瑞芬太尼+切口痛组(R+I组):左后爪建立切口痛模型的同时,皮下泵注瑞芬太尼80μg/kg(0.8m L/h),各组均持续泵注30min。采用足底热点仪和Von Frey纤毛测量各组小鼠建模前1d、建模后6h、1d、2d、7d的热缩足反射潜伏期(Paw Withdrawal Thermal Latency,PWTL)和50%机械缩足阈(Mechanical Paw Withdrawal Threshold,MWT)。随后,应用免疫组化检测AQP-4在小鼠脊髓L4~6节段的分布。采用Western blot检测R组小鼠脊髓腰段AQP-4在建模前1d、建模后1d、2d、7d的表达情况以及建模后2d各组小鼠脊髓腰段AQP-4、GLT-1和Cx43的表达情况。结果:建模前1d各组小鼠的PWTL和50%MWT无差别(P>0.05)。与建模前1d比较,建模后1d、2d、7d,除C组外,其余各组小鼠左后爪PWTL(LPWTL)和50%MWT(L50%MWT)均明显下降(P<0.05),并以建模后2d最为显著。与C组比较,I组、R组和R+I组建模后1d、2d小鼠的LPWTL和L50%MWT均明显降低(P<0.05)。除I组外,其余各组小鼠右后爪PWTL(RPWTL)和50%MWT(R50%MWT)的变化与左侧相同。AQP-4在脊髓灰质第I、II板层阳性表达强烈,在中央导水管附近也有明显表达。与建模前1d比较,R组小鼠在建模后2d腰段脊髓AQP-4表达水平显著增高,到7d仍高于基础水平(P<0.05)。与C组比较,I组、R组和R+I组小鼠建模后2d腰段脊髓AQP-4的表达均明显升高(P<0.05),而GLT-1表达均明显下降(P<0.05);与I组比较,R+I组AQP-4表达明显升高(P<0.05),而GLT-1表达则明显下降(P<0.05);GLT-1的表达趋势与AQP-4相反。与C组比较,R组小鼠建模后2d Cx43的表达水平虽有所增加,但差别无统计学意义(P>0.05)。结论:持续泵注瑞芬太尼可诱发痛觉过敏,且在建模后2d最为明显。AQP-4可能参与瑞芬太尼诱发的术后痛觉过敏,并可能与GLT-1共同起作用。