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骨骼肌生长和发育的调控机制是动物科学研究中的研究热点之一。骨骼肌主要是由肌纤维组成,内在和表观遗传调控机制的相互作用控制着各个发育阶段的肌纤维生成。长非编码RNA(lncRNA)是长度大于200nt且无蛋白质编码潜力的转录本,通过多种机制发挥众多功能。目前,已鉴定了多种对肌纤维形成具有重要影响的lncRNA,但大部分lncRNA的功能与机制尚不明确。本课题组前期通过高通量芯片技术,筛选出了在成肌细胞中敲低MyoD后显著下调的lncRNA-AK017263。本研究以小鼠C2C12细胞为研究材料,利用RNA干扰和过表达技术研究了lncRNA-AK017263对成肌细胞增殖和分化过程的影响。主要的研究结果如下:1.利用实时荧光定量PCR验证了AK017263在成肌细胞分化过程中,表达水平逐渐上升,并通过2月龄小鼠组织表达谱分析结果发现其在在腿肌、背最长肌和舌中高丰度表达。2.利用实时荧光定量PCR、Western Blot验证了干扰和过表达AK017263后对增殖标志基因Ki67和N-RAS mRNA和蛋白表达水平的影响,发现过表达AK017263可以显著促进增殖标志基因的表达,干扰AK017263可显著降低增殖标志基因的表达。通过EdU实验和流式细胞技术进行了进一步的验证,结果皆显示AK017263可以促进成肌细胞的增殖。3.利用实时荧光定量PCR、Western Blot、细胞免疫荧光技术验证了干扰和过表达AK017263后对分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC mRNA和蛋白表达水平的影响,结果显示过表达AK017263后分化标志基因的表达量显著上调,干扰AK017263可显著降低分化标志基因的表达,表明AK017263可以促进成肌细胞的分化。另外,发现AK017263能够促进MyHC1/slow,抑制MyHC2a和MyHC2b基因表达。4.通过在线软件预测发现AK017263与MEF2家族成员Mef2D可能存在互作,同时利用实时荧光定量PCR技术验证了干扰或过表达AK017263后Mef2D基因mRMA水平的表达变化,结果显示干扰AK017263后Mef2D基因的表达量显著降低,过表达AK017263后Mef2D基因的表达量显著上调,说明Mef2D与AK017263的表达存在正相关。本试验结果显示在小鼠肌肉中高表达的lncRNA-AK017263能够促进成肌细胞的增殖和分化,且能够调控不同肌纤维类型基因的表达,并初步预测了其发挥促分化功能的作用方式。本研究结果为进一步研究AK017263的作用机制奠定了基础,也为挖掘骨骼肌生长发育过程中重要lncRNA提供了新的证据。