目的:通过建立动静脉畸形(arteriovenous malformation,AVM)大鼠模型,探索动静脉畸形大鼠血管内皮细胞的生物学特性,以及EphB4、ephrinB2的表达,为进一步研究脑动静脉畸形(cerebral arteriovenous malformation,c AVM)中的血管生成机制奠定基础。方法:将6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠左侧颈总动脉的侧面与颈外静脉的近心端进行端侧吻合以建立动静脉畸形的大鼠模型,共造模50只大鼠进行后续实验。行数字减影血管造影(DSA)、电镜观察、HE染色和CD31、抗平滑肌抗体(SMA)免疫组化染色以验证模型,正常大鼠作为对照组。在细胞水平进行v WF、CD31、VE-Cadherin免疫荧光染色、MTT检测、细胞划痕试验、细胞凋亡实验、成管实验和VEGF的ELISA测定,以鉴定原代培养内皮细胞、观察AVM大鼠内皮细胞组与正常大鼠内皮细胞组两组之间细胞增殖、迁移、凋亡、成管以及VEGF分泌量的差异。使用免疫荧光染色初步观察EphB4、ephrinB2两种蛋白在细胞中的表达。采用RT-PCR(Reverse transcription-PCR,反转录PCR)法检测两组细胞EphB4、ephrinB2两种基因的表达量。Western blot检测法对EphB4、ephrinB2两种蛋白的表达进行定量分析。结果:50只接受造模的大鼠中,42只造模成功,模型成功率为84%。正常组和AVM模型组的血管之间存在形态学差异,AVM模型组发生了脑动静脉畸形的病理改变。MTT检测的AVM模型组内皮细胞的增殖能力强于正常组内皮细胞,在第1、3、5天三个时间点的p值分别为P=0.019,P=0.00009,P=0.039。划痕实验观察到AVM模型组内皮细胞的迁移能力高于正常组内皮细胞(p<0.05)。成管实验中,AVM模型组内皮细胞的成管能力大于正常组血管内皮细胞,在6h、12h、24h的p值分别为P=0.099,P=0.003,P=0.001,说明在6h后两组细胞间的成管能力出现差异。细胞凋亡实验检测到AVM模型组的血管内皮细胞凋亡率小于正常组。在AVM模型组中出现了更多的VEGF分泌,这可能说明VEGF分泌的增加与AVM模型组的增殖和迁移能力增加之间存在关系。EphB4/ephrinB2的免疫荧光染色提示,AVM阳性组中两蛋白的表达可能增加。EphB4/ephrinB2的RT-PCR结果表明,在模型组中,两种基因的表达都是增加的,表明通过手术造模的方式建立的大鼠AVM模型,其基因表达可能因为血流动力学的改变而发生了变化。Western blot实验结果证明,AVM阳性组的细胞中EphB4/ephrinB2两种蛋白的表达高于正常组细胞。结论:AVM大鼠模型和人的cAVM具有相似的血管病理结构。模型组血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力和VEGF分泌的增加以及细胞凋亡的改变,表明该模型改变了血管内皮细胞的生物学特性,EphB4、ephrinB2在模型组中的表达量升高,提示EphB4、ephrinB2两种蛋白可能在脑动静脉畸形发生发展过程中对血管具有调控的作用。这些改变是c AVM发展的基础,使用此模型可以进一步研究c AVM中的血管生成。EphB4、ephrinB2对血管的调控作用需要更深层面的研究。