【摘 要】
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目的(1)观察外侧臂旁核(LPBN)注射ghrelin对C57BL/6J小鼠夜间摄食的作用;(2)观察LPBN注射ghrelin对ghrelin受体敲除小鼠(GHSR-/-小鼠)以及ghrelin受体拮抗的C57BL/6J小鼠(中枢LPBN微量注射ghrelin受体拮抗剂[D-Lys3]-GHRP-6)摄食的作用;(3)观察LPBN长期注射ghrelin对C57BL/6J小鼠体重的影响;(4)观察
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目的（1）观察外侧臂旁核（LPBN）注射ghrelin对C57BL/6J小鼠夜间摄食的作用;（2）观察LPBN注射ghrelin对ghrelin受体敲除小鼠(GHSR-/-小鼠)以及ghrelin受体拮抗的C57BL/6J小鼠（中枢LPBN微量注射ghrelin受体拮抗剂[D-Lys3]-GHRP-6）摄食的作用;（3）观察LPBN长期注射ghrelin对C57BL/6J小鼠体重的影响;（4）观察ghrelin对LPBN中的葡萄糖敏感性神经元（GS）放电频率的影响;（5）观察LPBN长期注射ghrelin对C57BL/6J小鼠肩胛下棕色脂肪中解耦连蛋白1（UCP-1）表达的影响;（6）观察LPBN注射ghrelin后LPBN核团中c-fos免疫阳性神经元表达情况。方法（1）采用核团置管、核团微量注射及摄食行为学监测方法观察C57BL/6J小鼠、GHSR-/-小鼠LPBN注射ghrelin对其摄食行为的影响及C57BL/6J小鼠LPBN长期给药对其体重的影响;（2）通过细胞外在体电生理技术记录LPBN中神经元放电,观察ghrelin对LPBN中GS神经元的影响;（3）运用蛋白印迹方法检测C57BL/6J小鼠肩胛下棕色脂肪中UCP-1表达水平;（4）通过免疫组化方法观察向C57BL/6J小鼠LPBN中微量注射ghrelin对该核团c-fos免疫阳性神经元激活情况。结果（1）摄食行为监测结果显示,与0.9%NaCl相比,C57BL/6J小鼠LPBN注射300 pmol ghrelin可明显增加夜间1,2,3小时累积摄食量。(1st h 0.81±0.07 vs.0.31±0.09,P<0.05;2nd h 1.10±0.09 vs.0.64±0.05,P<0.05;3rd h 1.40±0.13 vs.1.04±0.09,P<0.05)（2）LPBN注射300pmol ghrelin与0.9%NaCl相比,可明显增加夜间前三小时累积摄食量,但其促食作用可被ghrelin受体拮抗剂[D-Lys3]-GHRP-6阻断,并且GHSR-/-小鼠中LPBN注射ghrelin,ghrelin的促食作用消失。（3）体重监测结果显示,连续6天LPBN注射300 pmol ghrelin,与0.9%NaCl相比,从第四天开始可明显增加C57BL/6J小鼠体重。(4th d 1.45±0.15 vs.0.82±0.22,P<0.05;5th d 1.97±0.26 vs.1.17±0.25,P<0.05;6thh d 2.19±0.28 vs.1.12±0.20,P<0.05)（4）细胞外在体电生理结果显示,LPBN中共记录到34个GS神经元放电,其中葡萄糖兴奋性（GE）神经元为15个;葡萄糖抑制性（GI）神经元为12个。与0.9%NaCl相比,微量注射1.5×10-88 M ghrelin可使GE神经元放电频率明显升高,（3.19±0.64 Hz升高至6.56±1.21 Hz,P<0.05）GI神经元放电频率明显降低。（3.66±0.77 Hz降低至1.51±0.34 Hz,P<0.05）（5）长期LPBN注射ghrelin小鼠与LPBN注射生理盐水组小鼠比较,ghrelin组小鼠肩胛下棕色脂肪中UCP-1蛋白表达量无明显改变。（P>0.05）（6）与LPBN注射生理盐水组小鼠比较,向LPBN核团中微量注射ghrelin小鼠组LPBN中c-fos免疫阳性神经元激活明显增加。（179.64±10.76 vs.129.88±14.67,P<0.05）结论:LPBN中微量注入ghrelin可与GHSR作用增加C57BL/6J小鼠夜间摄食量;ghrelin可作用于LPBN中GS神经元,主要作用于GI神经元;长期LPBN注射ghrelin可增加C57BL/6J小鼠体重;LPBN ghrelin可增加LPBN中c-fos免疫阳性神经元表达。
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