蜱是一种吸血的体外寄生虫,具有非常广泛的宿主范围。本研究中的麻点璃眼蜱(Hyalomma rufipes)为二宿主蜱,常见于荒漠和半荒漠地区,一般分布在我国的内蒙古、山西、宁夏、新疆等地。钝刺血蜱(Haemaphysalis doenitzi)为三宿主蜱,常见于野地和丛林中,主要分布在我国海南、福建、台湾、云南等地。蜱在吸血过程中能够传播多种病原体,对人类健康和畜牧业的发展产生极大威胁。目前蜱传疾病的防治仍以化学防治为主,但是长期使用化学药物会对环境造成污染,并且蜱长期适应产生的耐药性也是化学防治的短板,因此生物防治、免疫防治以及基因组学等逐渐成为蜱类防治的研究热点。铁蛋白(Ferritin)普遍存在于动物、植物和微生物中,是生物体维持铁稳态的重要蛋白,在解毒、抵抗氧化应激、参与先天免疫应答等方面发挥着不可或缺的作用。蜱吸血时要应对宿主血液中的大量铁和外源微生物,研究铁蛋白在蜱血餐消化和免疫防御过程中的作用机制具有深远意义。本论文以麻点璃眼蜱和钝刺血蜱为研究对象,利用基因克隆、原核表达、荧光定量PCR、RNAi等技术,系统的研究了三种蜱类铁蛋白。通过基因克隆,得到三条铁蛋白基因,分别命名为HrFer1、HrFer2和HdFer。其开放阅读框分别为519bp、573 bp和525bp,编码氨基酸个数分别为170、190、和172,等电点分别为4.94、5.51和4.71,蛋白质分子量分别约为20kDa、21kDa和20kDa。信号肽预测结果显示HrFer1、HdFer不含信号肽,而HrFer2的氨基酸序列在1-15aa存在信号肽。与其它物种铁蛋白构建系统发育树,发现HrFer1、HrFer2和HdFer与铁蛋白H亚基进化关系最近,与铁蛋白M亚基和L亚基的进化关系较远。对三种铁蛋白基因进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE电泳检测,显示重组蛋白大小分别约40 kDa、41 kDa和40 kDa,与预测大小一致。通过摸索和优化表达条件,对重组蛋白进行大量表达和纯化,结果表明rHrFer1、rHrFer2和rHdFer分别在250 mM、200 mM和250 mM的咪唑洗脱下,纯化出了较单一的蛋白。对重组蛋白的铁螯合活性和抗氧化活性进行分析,rHrFer1、rHrFer2和rHdFer均表现出呈浓度依赖性的蛋白活性。荧光定量PCR结果显示三种铁蛋白基因在蜱的卵巢和中肠中有较高的相对表达量,与其他组织有显著性差异。利用RNA干扰技术,探究铁蛋白对蜱生物学性状的影响,发现干扰HrFer1和HrFer2基因对蜱的饱血体重、产卵量和死亡率均有显著影响,另外干扰HrFer2基因还会显著影响蜱的吸血时间。HrFer1较HrFer2对麻点璃眼蜱的产卵量有更显著的影响。为了探究铁蛋白在中肠中高表达可能存在的作用,本研究对RNA干扰后蜱的中肠微生物群落进行了分析,发现干扰铁蛋白基因后,蜱中肠的微生物群落发生了变化,其中少量共生菌的相对丰度有下降趋势,有些致病细菌的相对丰度有上升趋势,表明铁蛋白可能在维持中肠微生物群落结构稳态方面发挥作用。对麻点璃眼蜱进行低温胁迫处理,发现在低温环境中,铁蛋白的相对表达量显著下降,说明HrFer1和HrFer2在麻点璃眼蜱抵御低温胁迫方面具有一定的调控作用。上述研究结果为全面揭示蜱类铁蛋白的作用机制提供了参考依据,为探究其具体功能奠定了基础。