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第一部分2型糖尿病大鼠胰岛β细胞中FoxO1、caspase-3的表达目的:探讨2型糖尿病大鼠胰岛β细胞中转录因子FoxO1与凋亡相关蛋白caspase-3的表达情况。方法:成年雄性SD大鼠,平均体重(170±20.5)g,随机分成正常对照组和糖尿病组,普通饲料适应性喂养1周后,正常对照组继续给予普通饲料喂养,糖尿病组给予高糖高脂饲料喂养。4周后糖尿病组大鼠按30mg/kg单次腹腔注射STZ溶液,72小时后尾静脉采血测非禁食血糖,以血糖≥16.7mmol/L作为2型糖尿病建模成功的判断标准,未成模者剔除。正常对照组大鼠以等体积枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液腹腔注射。注射后正常对照组继续普通饲料喂养,糖尿病组继续高糖高脂饲料喂养,共16周。分离胰腺观察胰腺组织病理学变化;免疫组织化学方法观察转录因子FoxO1与凋亡相关蛋白caspase-3在胰腺组织中表达。结果:成功构建2型糖尿病大鼠模型。病理检验显示,与正常对照组大鼠相比,糖尿病组大鼠胰岛数量明显减少(P＜0.01),胰岛结构也发生显著改变。FoxO1在糖尿病大鼠胰岛β细胞的表达以胞核为主,而在正常大鼠胰岛β细胞内,以胞浆的表达为主。caspase-3在糖尿泊笫蟆⒄４笫笠鹊害孪赴芯斜泶?但表达水平不同。FoxO1核内高表达的阳性细胞与caspase-3阳性细胞相对应。结论:FoxO1相对特异性表达于胰岛β细胞中,FoxO1可能与胰岛β细胞凋亡有关。第二部分转录因子FoxO1参与调控2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的研究目的:探讨胰腺组织中胰岛β细胞凋亡是否与转录因子FoxO1在细胞核内高表达有关。方法:构建2型糖尿病大鼠模型,分离胰腺制备成石蜡切片,用免疫组织化学方法检测转录因子FoxO1与凋亡相关蛋白caspase-3在胰岛β细胞中的表达水平;TUNEL化学染色方法检测胰腺组织中胰岛细胞的凋亡情况;再用免疫组织荧光联合TUNEL荧光检测技术观察FoxO1、caspase-3的表达与胰岛细胞凋亡的关系。结果:TUNEL染色与FoxO1、caspase-3结果相似,糖尿病大鼠胰岛β细胞中阳性率均高于正常大鼠(P＜0.01),且胞核内FoxO1表达水平与caspase-3、TUNEL均呈正相关(P＜0.01)。免疫组化荧光联合TUNEL荧光检测结果显示,FoxO1(核内)与caspase-3高表达的胰岛细胞正是发生凋亡的胰岛细胞。结论:转录因子FoxO1参与了对2型糖尿病大鼠胰腺组织中胰岛β细胞的凋亡调控。