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目的:前期研究中,我们发现参苓白术散可增加有机试剂致皮肤物理屏障功能障碍小鼠模型的皮肤水合度、减少经皮水分丢失、减少表皮增厚、减少角质层过度角化与角化不全、增加表皮总脂质量,具有修复皮肤物理屏障功能的作用。本研究观察参苓白术散对模型小鼠表皮细胞间脂质游离脂肪酸、胆固醇、神经酰胺及各类神经酰胺含量的影响,特别是对在屏障功能中必不可少的酰基神经酰胺的含量及合成代谢过程的影响。此外,观察参苓白术散对紧密连接蛋白表达的影响,以从表皮细胞间脂质和紧密连接蛋白两方面阐释参苓白术散修复皮肤物理屏障功能的机制,为中医临床应用健脾方治疗皮肤屏障功能障碍性皮肤病提供用药依据。方法:1.实验动物的分组与处理将ICR小鼠随机分为造模1天、3天、5天、7天四个时间组,每个时间组内再随机分为正常对照组、模型组、参苓白术散组。实验第1天起,参苓白术散组按20 g/kg灌胃给予参苓白术散水煎液,其余各组灌胃等体积蒸馏水,每天1次,连续17天。实验第10天,剃去各组小鼠颈背部毛。实验第11天起,除正常对照组外,其余各组采用有机试剂（丙酮:乙醚=1:1）法复制小鼠皮肤物理屏障功能障碍模型,2次/天,2次间隔8 h。分别于造模1天、3天、5天、7天后取各组小鼠颈背部皮肤,用1.2 cm×1.2 cm的方形打孔器,打成若干方片,-80℃保存,用于后续各项指标检测。2.参苓白术散调节表皮细胞间脂质以修复皮肤物理屏障功能的研究取各组小鼠皮肤组织,ELISA法测定小鼠表皮中FFA、CHOL含量,高效液相色谱串联质谱系统非靶向脂质组学分析平台测定表皮中Cer总量、各类Cer含量,Western Blot法检测ACer合成途径中合成酶ELOVL1、ELOVL4、CYP4F22、CERS3、PNPLA1的蛋白表达,比较组间差异。3.参苓白术散调节紧密连接蛋白的蛋白表达以修复皮肤物理屏障功能的研究取各组小鼠皮肤组织,Western Blot法检测紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin的蛋白表达,比较组间差异。结果:1.参苓白术散调节表皮细胞间脂质以修复皮肤物理屏障功能的研究（1）升高模型动物表皮细胞间脂质FFA造模1天、3天、5天、7天,与正常对照组比较,模型组小鼠表皮FFA含量降低或呈降低趋势（P<0.01,P>0.05,P<0.001,P<0.001）。造模3天、7天,与模型组比较,参苓白术散组表皮FFA含量有升高趋势（P>0.05）。造模5天,参苓白术散组表皮FFA含量较模型组升高（P<0.01）。（2）升高模型动物表皮细胞间脂质CHOL造模1天、3天、5天、7天,与正常对照组比较,模型组小鼠表皮细胞间脂质CHOL含量均显著降低（P<0.001）。造模3天、5天,与模型组比较,参苓白术散组表皮CHOL含量有升高趋势（P>0.05）。造模7天,与模型组比较,参苓白术散组表皮CHOL含量较模型组升高（P<0.01）。（3）对模型动物表皮细胞间脂质Cer的影响造模1天、3天、5天、7天,模型组小鼠表皮Cer总含量较正常对照组呈降低趋势（P>0.05）;造模1天、5天,参苓白术散组表皮Cer总含量较模型组升高（P<0.01,P<0.05）。在小鼠表皮中共检测到8类神经酰胺,即Cer-NS、Cer-ADS、Cer-NH、Cer-NP、Cer-AH、Cer-AP、Cer-EOS、Cer-EOH,后2类为超长链ACer。造模1天,参苓白术散组表皮Cer-NP、Cer-AH含量较模型组升高（P<0.05）;造模3天,模型组表皮中Cer-EOH含量较正常对照组降低（P<0.05）,模型组Cer-AH含量较正常对照组升高（P<0.05）,参苓白术散组Cer-AH含量较模型组降低（P<0.05）;造模5天,参苓白术散组表皮Cer-NS、Cer-ADS、Cer-NP、Cer-AH含量较模型组升高（P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01）。8类Cer中Cer-EOS和Cer-EOH为超长链ACer,在皮肤物理屏障中起关键作用。造模3天,模型组表皮ACer含量较正常对照组降低（P<0.05）;造模5天,模型组表皮ACer含量较正常对照组显示了下降趋势（P>0.05）,参苓白术散组表皮ACer含量较模型组升高（P<0.05）。（4）对模型动物皮肤中ACer合成途径中酶的蛋白表达的影响造模3天、5天、7天,模型组动物皮肤中ELOVL1蛋白表达较正常对照组降低（P<0.05,P<0.01,P<0.05）。造模3天、5天,与模型组比较,参苓白术散组ELOVL1蛋白表达有升高趋势（P>0.05）。造模7天,参苓白术散组ELOVL1蛋白表达较模型组升高（P<0.05）。造模1天、3天、5天、7天,模型组动物皮肤中ELOVL4蛋白表达较正常对照组降低或有降低趋势（P>0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.05）。造模1天、3天,参苓白术散组ELOVL4蛋白表达较模型组有升高趋势（P>0.05）。造模5天、7天,参苓白术散组ELOVL4蛋白表达较模型组升高（P<0.05）。造模1天、3天、5天,模型组动物皮肤中CYP4F22蛋白表达较正常对照组降低（P<0.05,P<0.01,P<0.01）。造模1天,参苓白术散组CYP4F22蛋白表达较模型组有升高趋势（P>0.05）。造模3天,参苓白术散组CYP4F22蛋白表达较模型组升高（P<0.01）。造模5天、7天,模型组动物皮肤中CERS3蛋白表达较正常对照组降低（P<0.05）,参苓白术散组CERS3蛋白表达较模型组有升高趋势（P>0.05）。造模3天、5天、7天,与正常组比较,模型组动物皮肤中PNPLA1蛋白表达降低或有降低趋势（P<0.01,P<0.01,P>0.05）。造模3天,参苓白术散组PNPLA1蛋白表达较模型组升高（P<0.05）。造模5天,参苓白术散组PNPLA1蛋白表达较模型组有升高趋势（P>0.05）。2.参苓白术散调节紧密连接蛋白的蛋白表达以修复皮肤物理屏障功能的研究造模3天、5天、7天,模型组动物皮肤中Claudin-1蛋白表达较正常对照组降低（P<0.01）;造模5天、7天,参苓白术散组Claudin-1蛋白表达较模型组升高（P<0.05）。造模5天、7天,模型组动物皮肤中Occludin蛋白表达较正常对照组降低（P<0.01,P<0.05）;造模5天,参苓白术散组Occludin蛋白表达较模型组升高（P<0.05）。结论:参苓白术散可提高有机试剂致皮肤物理屏障功能障碍模型小鼠的表皮中FFA、CHOL、Cer含量,并提高Cer中长链ACer含量及ACer合成途径中ELOVL1、ELOVL4、CYP4F22、PNPLA1酶的蛋白表达,通过提高细胞间脂质含量发挥修复皮肤物理屏障功能作用;此外,参苓白术散还可提高皮肤中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin的蛋白表达,通过增强细胞间紧密连接发挥修复皮肤物理屏障功能作用。