伴随着生物技术的进步,转基因作物在全球范围内得到广泛的种植。转基因技术打破了生殖隔离的限制,使得转基因作物整合了多物种的基因。虽然未有科学数据直接证明,但是转入的外源基因仍然对环境和食品安全构成潜在的威胁。所以对于转基因作物以及相关产品的安全性评价、监管和检测显得尤为重要。本论文主要研究利用新型核苷酸探针和DNA扩增方法联用对转基因成分进行检测的方法。在研究过程中,使用核苷酸探针与DNA扩增方法联合使用,并探索出合适的体系,以及联用体系在不同条件下的通用性。通过设计一段包含G-四链体互补序列的特异性探针用于等温扩增方法,对含Bt基因部分序列的单链DNA分子进行可视化检测。通过优化,确定了1μL 10X Isothermal Amplification和0.5μL 10X NEBuffer 3.1、10mM Mg²⁺、4μM Hemin、5U Nb.BbvCI、4U Bst 2.0 WarmStar,并使用三片层的分子内G-四链体探针作为最优反应体系,孵育60min完成对目的基因的检测。建立了一种简单的,无需标记的G-四链体等温扩增检测体系。进一步通过将G-四链体核苷酸探针和两种DNA扩增方法联用。以转基因水稻科丰6号基因组DNA作为对cry1Ab/cry1Ac基因检测的目标DNA,为了降低背景信号对检测结果的影响,使用初始1μM浓度的含有分子内G-四链体结构的引物进行PCR反应。当体系内存在存在cry1Ab/cry1Ac基因的植物基因组DNA时,会通过PCR和等温扩增的反应过程,使体系内积累大量的G-四链体,并通过显色系统使本来无色的溶液变成蓝绿色。基于此,建立了一种可以直接从转基因实际样品中检测cry1Ab/cry1Ac基因的可视化检测方法。除此之外,还探索了级联扩增方法在检测其他转基因作物样品时,特别是具有复杂基因组结构的转基因玉米MON89034的检测效果。使用5μL和2μL的对应各自检测体统的引物分别用于Nb.BbvCI和Nt.BstNBI检测体系的PCR过程,之后再分别在37℃和55℃酶的最适温度下孵育30min。最终Nb.BbvCI体系和Nt.BstNBI体系分别对MON89034的检出限为100拷贝和50拷贝,达到了转基因检测的要求。因此,建立了一种选择性好,并且具有通用性的可视化转基因检测方法。