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精子发生是一系列基因严格按照时空顺序相继转录表达的过程。寻找和研究不同时期、不同发育阶段的差异表达基因，将有助于最终阐明精子发生的机理。由于大鼠生精细胞在曲细精管内的排列极为有序，本研究采用曲细精管分段分离结合差异显示PCR（DDRT-PCR）的方法，寻找精子发生中差异表达的基因。 在解剖显微镜下根据折光度不同将曲细精管分出Ⅱ～Ⅵ期和Ⅶ～Ⅷ期两段，Ⅱ～Ⅵ期中包含精原细胞分裂产生A、B两型精原细胞、变形期初级精母细胞向粗线期精母细胞的转化和2～6级以及15～18级精细胞，Ⅶ～Ⅷ期中包含A型精原细胞、休止型精母细胞、粗线期精母细胞、7～8级和19级精细胞以及成熟精子的释放，Ⅶ～Ⅷ期中不含细胞分裂。提取两段的组织总RNA并反转录成cDNA，以3个Oligo-dT12N（N为A、C、G）单锚定引物分别与上游8个随机引物进行24种配对组合，共48个扩增反应，经聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影后选出112个差异cDNA条带，再经反向Northern斑点杂交验证，有76个cDNA条带代表的基因在不同区段中存在差异转录，其中17个差异达10倍以上。对36个有差异的cDNA条带进行克隆测序，得到22个彼GenBank接收的新的Expression Sequence Tags（ESTs），其中来自Ⅱ～Ⅵ期的有14个（AF094604、AF094605、AF094606、AF094607、AF095318、AF095320、AF095321、AF095322、AF095324、AF095325、AF096087、AF096088、AF096089、AF134584、），来自Ⅶ～Ⅷ期的有8个（AF095319、AF095323、AF096090、AF133655、AF133656、AF133287、AF133288、AF133289）。 在此基础上，选择6个ESTs作为混合探针筛选大鼠睾丸cDNA文库，得到一新的全长2183bp、编码526个氨基酸的cDNA序列（GenBank接收号为AF094609），命名为R337，其编码蛋白的预测分子量为60000，等电点为4.0，经蛋白数据库分析发现其氨基酸序列存在一个P34cdc2的磷酸化位点、一个蛋白激酶A（PKA）磷酸化位点、多个蛋白激酶C（PKC）和酪蛋白激酶Ⅱ（CK-Ⅱ）的磷酸化位点以及多个DNA结合Motif。