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厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)是一种兼性寄生菌,既能寄生线虫又能在土壤中营腐生生活,能寄生根结线虫、包囊线虫的卵和雌虫,是重要的植物寄生线虫生防菌,对防治植物线虫病害具有较大的生防潜力。由于土壤对真菌萌发、生长和定殖的普遍抑制作用,从而影响了生防菌的防治效果,导致生防菌在田间的防治效果和持续性不稳定。本文对P.chlamydosporia ZK7菌株土壤连续诱导、厚垣孢子的产生条件、菌剂载体与助剂的筛选、制剂的制备和田间应用以及施入土壤后的动态变化规律等方面进行了研究。实验结果如下: 1.经土壤的连续诱导,ZK7逐渐获得了适应土壤环境生长的能力,获得了菌落产孢量比对照多16.43%的ZK7菌株。 2.对ZK7菌株产厚垣孢子的培养基和培养条件进行筛选,获得了ZK7产厚垣孢子较多且时间最短的玉米秸秆粉培养基。 3.对ZK7生防菌剂制备的载体和助剂进行生物相容性评价和筛选,结果表明:载体硅藻土和草炭的生物相容性较好。另外筛选了生物相容性较好的润湿剂吐温-80,分散剂聚乙二醇6000,浓度分别为2ul/ml、500ug/ml,和保护效能较稳定的紫外保护剂抗坏血酸。也进行了ZK7孢子萌发促进剂的筛选,获得了最佳的孢子萌发促进剂配方葡萄糖、精氨酸和FeSO4。 4.经锐孔凝固浴法制备ZK7颗粒微胶囊,结果表明当海藻酸钠浓度为1.0%时,微胶囊滴加制备方便,可不用外力,自动恒速滴加,且制备得到的微胶囊光滑、圆润,无拖尾和突起;而当CaCl2浓度高于2.0%时,其对微胶囊的固化较牢固,使微胶囊内的微生物不易受到外界萌发因子的刺激而较难萌发。也制备了萌发率与线虫必克微粒剂相当的颗粒剂和可湿性粉剂。 5.生防菌ZK7对红河弥勒烟草的防病促生效果实验表明:ZK7、食线虫芽孢杆菌(Bacillus nematocidus)B16复配和ZK7、食线虫芽孢杆菌B16、粪生链霉菌(Streptomyces fimicarius)YMM复配对烟草株高、叶面积系数、单叶平均面积和最大四叶平均面积都表现出较好的促生效果,其中与对照相比单叶平均面积增多率分别为20.26%和12.19%。而在根结线虫发病较为严重的玉溪江川,ZK7与YMM的复配菌剂防效为40.7%。 6.生防菌对新型油料经济作物印奇果根结线虫病的防治表明:施用生防菌剂能有效抑制印奇果根际土壤中根结线虫的生长和繁殖,降低线虫虫口数。随着ZK7生防菌剂量的增加,根结线虫幼虫减退率分别为43.53%和47.98%;防效分别为29.36%和34.94%。而半年后含ZK7的处理Ⅰ和处理Ⅲ对土壤中根结线虫的二龄幼虫仍然具有一定的防治效果,且土壤中还能检出ZK7。 7.本论文的创新之处就是通过土壤连续诱导和液体培养产生厚垣孢子,并将其菌剂应用于田间,提高生防菌在田间的定殖。