一直以来抗生素被广泛应用于疾病防治,然而,抗生素的滥用是一个不容忽视的问题,特别是动物饲料中抗生素的滥用会不可避免地导致蜂蜜、鸡蛋、鱼、奶等动物源性食品中的抗生素残留。食品中残留的抗生素被人摄取,对人体造成伤害,如四环素（TET）残留能够引起腹痛、腹泻、胀气、呕吐,而氯霉素（CAP）残留会引起严重的骨髓抑制和再生障碍性贫血。因此农业农村部规定了动物源性食品中抗生素残留限量,在乳制品和鱼类中的四环素最高残留限量为100 μg/kg,而氯霉素则被禁止添加。为了检测氯霉素和四环素等抗生素,常用的金标准方法有液相色谱-质谱法和高效液相色谱法。这些方法虽然能以极高的灵敏度和准确度检测抗生素,却需要昂贵的设备、专业人员和复杂的样品前处理过程,只适合实验室检测环境。除色谱法外,电化学传感器在检测抗生素方面具有灵敏度高、速度快等优点,但其检测稳定性较差;化学发光、荧光等光信号技术也可用于抗生素的检测;利用基于表面增强拉曼散射和表面等离子体共振的方法,也可以进一步提高抗生素的检测灵敏度。然而,这些光学传感器需要昂贵的硬件设备,如紫外可见分光光度计、拉曼光谱仪、显微镜或Biocore系统,因此仍然不适用于现场检测。在本文中,为了获得灵敏、准确的现场快速检测,我们建立了一种基于比色间接竞争ELISA原理在喷蜡纸芯片上定量检测西环素和氯霉素的检测方法。纸芯片只需喷蜡打印和表面修饰的过程,单次检测成本低至1元,在检测过程中,仅需要加样、清洗、显色等简单操作,并且在10 min内即可完成检测。除此之外,我们设计了一种检测系统的配套智能手机APP,该APP具有图像记录、校正、分析等功能。通过手机软件对每个检测孔区域的红色通道的强度值进行分析,获得每个检测样品的强度值与相对应的阴性对照孔的强度值的比值,即（It/Ic）R,再通过测定（It/Ic）R的值来定量抗生素的浓度。经过检测一系列四环素和氯霉素标准品溶液,本实验检测系统在四环素检测和氯霉素检测中的检测限分别为0.5 ng/mL和0.05 ng/mL,并且分别在1-103 ng/mL和0.1-100 ng/mL之间有良好的线性关系。在纸芯片上检测其他类抗生素,发现本实验的检测系统保持较好的抗干扰能力,可用于四环素和氯霉素的特异性检测。本实验检测系统的重复性研究结果表明四环素标准品检测的变异系数为3.2%-3.8%,氯霉素标准品检测的变异系数为2.2%-2.8%,说明方法的重复性良好。稳定性研究结果显示本实验制备的纸芯片可在4℃保存达90天左右。最后通过比较本检测系统与商品化ELISA试剂盒及胶体金试纸条的检测限,表明本实验的检测系统具有优异的检测性能。除此之外,分别用纸芯片检测方法和HPLC方法同时检测牛奶和鱼肉样品中的四环素和氯霉素。根据实际样品检测结果,纸芯片检测四环素的检测限可达到0.5 ng/mL,氯霉素为0.05 ng/mL,与检测标准样品检测限相似,具有潜在的实际应用价值。