PTN(pleiotrophin)是1989年从牛子宫中发现并提纯的一种生长因子，与肝素具有较高的亲和性。随着研究的不断深入，发现该因子分布广泛且具有多重生物活性，故而后期重新命名为多效生长因子。PTN是一个拥有168个氨基酸的蛋白，包含32个氨基酸残基组成的信号肽，在不同种属间高度保守。现有研究表明PTN在癌细胞增殖中也扮演着重要角色。鹿茸再生以及神奇的增殖速度是自然界非常罕见的，因此也成为科学研究的热点，有相关学者认为鹿茸角再生机制是再生生物学研究的理想模型，并且对鹿茸角增殖机理的研究也有可能成为癌症治疗新的突破点。　　本试验根据Genbank中同源物种牛的基因序列设计了PTN基因带酶切位点的同源引物。采用RT-PCR技术、分子克隆技术成功获得梅花鹿鹿茸组织PTN基因cDNA序列，通过对测序结果进行核苷酸和氨基酸序列比对发现，PTN基因cDNA序列长750bp，共编码168个氨基酸，经NCBI中Blast功能比对，结果显示梅花鹿PTN基因与白尾鹿、牛、绵羊同源性较高，核酸序列分别为98％、97％、96％，证明该基因在进化上相对比较保守，符合功能基因特点。运用MEGA5.0构建系统进化树显示梅花鹿与白尾鹿、牛、绵羊等偶蹄目动物进化关系较近，与人、普氏野马、北非果蝠亲缘关系较远，这一进化特点也符合经典分类学观点，从侧面反映了本研究结果的可靠性。Real-time PCR检测PTN基因在鹿茸间充质组织不同时期的相对表达量，结果显示中期表达量比前期和后期都高。　　将pMD-18T-PTN菌液活化后提取质粒，经双酶切后与同样经过双酶切的真核表达载体pEGFP-C1连接，构建重组质粒转化到DH5α细胞中，经PCR和双酶切鉴定分析，成功构建pEGFP-C1-PTN真核表达载体。将其瞬时转染到复苏培养传代2次生长良好的293T细胞中，荧光显微镜下观察到绿色荧光，证明转染成功。对实验组和对照组细胞同时进行RNA提取，通过Real-time PCR检测发现，PTN在实验组的表达量是对照组的约16倍，说明pEGFP-C1-PTN真核表达载体在293T细胞里成功表达。Real-time PCR检测发现当梅花鹿PTN基因在293T细胞中过表达时，HOXA5、MMP3、MMP10mRNA表达水平均显著下降，EGF基因mRNA表达水平有显著上调。