绿色荧光蛋白（GFP）作为生物标记物,已被广泛应用于多个研究领域,并获得了丰富的成果。本文即以绿色荧光蛋白为标识物,通过环磷酰胺建立小鼠免疫模型,并以肽聚糖调节小鼠免疫功能,探讨绿色荧光蛋白在小鼠免疫功能受抑制和恢复状态中的表达,以及其表达与调节剂的作用程度、时间之间的关系,为适时研究小鼠免疫功能提供新的方法。首先,以阳离子聚合物为载体,体外转染GFP基因至小鼠胸腺、肝、脾细胞,筛选出GFP表达率较高的细胞作为研究对象。体外转染后36h,GFP在胸腺细胞中的表达率达到90%以上,脾、肝细胞中的表达率则低于10%。选择胸腺细胞为对象,试验不同锌源及剂量对GFP表达的影响,以建立营养素调控模型,但两种锌对GFP表达没有明显的促进作用。体内试验中,选择环磷酰胺来调节小鼠机体的免疫功能,研究GFP在胸腺中的表达与小鼠免疫功能之间的关系。环磷酰胺的免疫抑制作用具有剂量效应,当剂量为100mg/kg时,小鼠胸腺明显萎缩,同时,GFP表达率大幅度下降。正常的小鼠胸腺中,转染后72-80h时GFP表达率达到最大值,在90%以上。而转染24h后注射100mg/kg剂量环磷酰胺的小鼠,在CY注射18h时,小鼠免疫功能受到的抑制作用达到最大,此时胸腺中GFP的表达率也达到最大值,约18%。CY注射后18h~48h之间,GFP表达阳性率逐渐降低,表明不仅环磷酰胺的免疫抑制作用具有时间效应,GFP的表达及在细胞中的存在也具有时间效应。最后,本文以肽聚糖来拮抗环磷酰胺的抑制作用,并通过GFP的表达观察其效果,证明GFP在此模型中的作用以及模型的应用性。在注射转染液和环磷酰胺前,试验组小鼠连续三天注射肽聚糖,每天25mg/kg。联合注射肽聚糖的试验组,小鼠胸腺中的GFP+细胞数比CY抑制组高63.1%,总细胞数为CY抑制组的1.26倍,GFP+阳性率为CY抑制组的1.29倍,差异显著（P<0.05）。但是,和对照组相比,试验组小鼠胸腺的GFP+细胞数、总细胞数和GFP+阳性率分别为对照组的62.9%、76.6%和82.1%,差异显著（P<0.05）。