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细胞程序性死亡配体-1（Programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1）是一种免疫检查点蛋白,肿瘤细胞表面的PD-L1与T细胞表面的细胞程序性死亡受体-1（Programmed cell death protein 1,PD-1）的结合帮助肿瘤细胞逃避免疫监察。通过PD-1或PD-L1抗体来阻断PD-1与PD-L1的结合,重新激活T细胞免疫功能,是一种重要的癌症免疫治疗策略,为大量癌症患者提供了显著的生存优势。目前,已有多种靶向PD-1/PD-L1的抗体被FDA批准用于癌症的临床治疗,但对PD-L1调控机制的了解仍然有限,限制了此类免疫疗法临床疗效的提升。本研究旨在通过预测PD-L1的结合蛋白,发现PD-L1的新调控机制。本研究以寻找PD-L1的结合蛋白为出发点,利用噬菌体表面展示技术筛选与PD-L1结合的多肽,并根据多肽序列进行比对,寻找可能与PD-L1结合的蛋白。经过筛选,获得了5个与PD-L1结合的含有12个氨基酸残基的多肽。经过NCBI数据库检索后发现,多肽D4与动力蛋白激活蛋白亚基4（Dynactin 4,DCTN4）匹配。经研究发现,D4融合溶酶体分选信号表达时,使PD-L1的表达水平明显下调,提示PD-L1结合D4融合多肽后被靶向溶酶体降解,D4具有作为靶向PD-L1的治疗性药物的潜力。此外,我们利用外源表达的DCTN4与PD-L1进行Co-IP分析,证实了DCTN4与PD-L1可以在细胞内形成复合体,且DCTN4至少有两个结构域可能参与了与PD-L1胞内复合体的形成。DCTN4在人体多种正常组织中广泛表达,如脑、肾、肝等,具有重要生理功能。经过检测,我们发现DCTN4在肿瘤细胞DLD1、DKS8、HKE3、HCT-116、Hep3B、PLC、5637及MGC-803中均有表达。同时,我们在DLD1稳转细胞系中探究了DCTN4过表达对DLD1细胞增殖、迁移、集落形成的影响,发现DCTN4过表达不影响DLD1细胞的集落形成能力,但却能够明显抑制DLD1细胞的增殖和迁移能力。表明DCTN4对DLD1细胞的部分细胞功能有调控作用,但是否通过与PD-L1形成复合体而发挥作用还有待进一步探究。本研究将为发现靶向PD-L1的多肽类药物以及PD-L1的调控机制提供方向,同时也为发现癌症治疗新方法奠定基础。