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目的：通过siRNA（RNAi）干扰技术选择性下调TLR4基因的表达，探讨高糖对大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）Toll样受体4（Toll like receptor，TLR4）及其转接子髓分化因子88（myeloid differentiation88, MyD88）和炎性因子分泌的影响。方法：常规培养细胞后将细胞分3组：1、正常糖组2、高糖组3、AngⅡ组，干预12小时后提取细胞总RNA及总蛋白，采用荧光定量PCR检测TLR4、MyD88mRNA的表达，western blot检测TLR4、MyD88及NF-kB蛋白表达水平的变化，分析高糖及AngⅡ对TLR4/MyD88信号通路的影响。设计并合成3对针对大鼠TLR4基因的特异性siRNA片段，以带有红色荧光的BLOCK-ITAlexaFluor作为阴性对照，在荧光显微镜下观察细胞转染效率，转染成功后将细胞分组为1、正常糖组2、高糖+AngⅡ组3、高糖+AngⅡ+阴性对照组4、高糖+AngⅡ+siRNA1组5、高糖+AngⅡ+siRNA2组6、高糖+AngⅡ+siRNA3组，用PCR检测TLR4mRNA的表达变化，挑选基因沉默效率最佳的siRNA用于进一步实验，将细胞分组：1、正常糖组2、高糖+AngⅡ组3、高糖+AngⅡ+阴性对照组4、高糖+AngⅡ+siRNA组5、高糖+AngⅡ+厄贝沙坦组6、高糖+AngⅡ+厄贝沙坦+siRNA组，采用荧光定量PCR检测TLR4、MyD88mRNA的表达，western blot检测TLR4、MyD88及NF-kB蛋白表达水平的变化，同时收集细胞上清液用ELISA法检测IL-6、及MCP-1的表达。结果：高糖及AngⅡ都可以上调TLR4、MyD88mRNA及TLR4、MyD88及NF-kB蛋白的表达水平（P＜0.01）。siRNA技术可选择性下调TLR4mRNA的表达，以siRNA3基因沉默效果最佳，与正常组相比，高糖+AngⅡ组TLR4、MyD88及NF-kB蛋白及TLR4、MyD88mRNA表达明显上调（P＜0.01），IL-6、及MCP-1的表达亦上调（P＜0.01），阴性对照组与高糖+AngⅡ组差异无统计学意义（P>0.05），siRNA组及厄贝沙坦组TLR4、MyD88及NF-kB蛋白表达明显下调，TLR4、MyD88mRNA明显下调，IL-6、及MCP-1的表达亦下调，且两者共同作用下效果增强（P＜0.01）。结论：高糖及AngⅡ刺激下可激活TLR4/MyD88信号通路，上调TLR4及下游炎性因子的表达，特异性siRNA基因沉默可以阻断由高糖及AngⅡ诱导的TLR4信号通路的激活，厄贝沙坦也可阻断TLR4信号通路的激活，TLR4信号通路在大鼠肾小管上皮细胞炎性反应机制中发挥关键作用，siRNA基因沉默技术为寻找糖尿病肾病的治疗方法提供了另一个路径。