结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是严重威胁人们健康和生命的癌症疾病类型,随着科技进步已在CRC的预防、诊断和治疗等方面取得了重大进展,但全球范围内CRC患者发病率与死亡率仍居高不下。其中原因主要包括结直肠癌临床类型复杂,CRC患者术后肿瘤复发及转移和缺乏早期诊断及预警靶标标志物等,重要的是早期发现是减少死亡率的重要举措之一。因此,筛选和研究早期诊断生物标志物对CRC诊断、预后、乃至治疗都具有重要的意义。黑素皮质素受体1（Melanocortin-1 receptor,MC1R）被认为是黑色素瘤预后不良标志物,也是黑色素瘤潜在的治疗靶点。研究发现,MC1R与多种细胞生物功能相关,如细胞增殖和分化、色素形成和基因损伤修复等。此外,MC1R的一些单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism,SNP）参与了黑色素瘤的发生和发展,提示该基因在黑色素瘤进程中可能具有重要作用。最近研究显示,MC1R与CRC之间也存在相关性。本研究的目的是检测MC1R在CRC肿瘤与癌旁组织中的表达水平,分析与CRC有关MC1R SNPs位点,探讨MC1R的表达水平和SNPs与CRC临床病理指标的相关性,并进一步探究MC1R对CRC细胞增殖的影响。首先,通过生物信息学分析MC1R表达水平及与CRC各病理指标的相关性。结果显示,CRC肿瘤组织中MC1R m RNA表达水平明显低于正常结直肠组织,且其表达水平与CRC患者的T分期、N分期及TNM分期等病理指标相关。进一步分析表明,MC1R可作为CRC独立预后分子,且高表达MC1R与CRC预后不良相关。此外,MC1R m RNA表达水平与多个错配修复基因、免疫检查点基因及CRC差异基因等基因的m RNA表达水平和免疫细胞浸润等都相关。研究还发现MC1R可能负调控CRC肿瘤细胞增殖。从吉林大学中日联谊医院收集86例CRC肿瘤组织样本和83例癌旁组织及相关病历资料。通过反转录荧光定量PCR及免疫印迹法检测CRC肿瘤及癌旁组织中MC1R表达水平,并分析MC1R表达量与CRC病理指标之间的相关性。与生物信息学分析结果一致,CRC肿瘤组织中MC1R m RNA和蛋白表达水平都明显低于癌旁组织。此外,MC1R蛋白表达水平与MLH1,PMS2和P53等蛋白表达水平相关。为分析与CRC有关的MC1R SNP位点,提取CRC肿瘤组织的基因组DNA。通过PCR扩增MC1R CDS基因片段,结合测序分析探究CRC中是否存在特异的MC1R SNP位点,并进一步分析MC1R SNP位点与CRC病理指标的相关性。研究发现,CRC中存在4个MC1R SNP突变位点,分别为:rs2228479、rs885479、rs33932559和rs377411334。其中rs2228479与Ki67表达相关;rs885479与患者的年龄和T分期相关。生物信息学、临床组织MC1R表达水平检测和MC1R SNP位点分析结果揭示了MC1R可能参与CRC发生发展的过程。因此,进一步构建MC1R敲降和过表达CRC细胞模型,并结合CCK-8、Ed U和免疫荧光检测Ki67表达量等方法探究MC1R对CRC细胞增殖的影响。研究表明,下调MC1R蛋白表达可促进HCT116及SW620两种CRC细胞的增殖;反之,过表达MC1R则抑制SW480及Caco-2两种CRC细胞的增殖。综上所述,本研究揭示了CRC肿瘤组织中MC1R m RNA和蛋白表达水平都明显低于癌旁组织,MC1R表达水平与CRC患者MSI相关。CRC患者肿瘤组织中存在4个MC1R SNP突变位点。此外,MC1R可负调控CRC细胞的增殖。以上研究表明MC1R是参与CRC发生发展过程中的重要分子。