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目的:通过观察大鼠大脑中动脉栓塞模型脑组织膜蛋白NR2B、NR2B-Ser1303与NR2B-Tyr1472蛋白的表达半定量,探究穿心莲内酯的运用,对脑梗死后缺血组织的影响,以及穿心莲内酯对脑梗死后缺血组织的保护机制.方法:1将75只雄性SD实验大鼠随机分为五组:Sham组、pMCAO组、Vehicle组、Andro-L组、Andro-H组。在实验准备环节,用药组及模型组在制备鼠模型时,两者都使用鱼线栓塞法展开,形成鼠大脑中永久性的动脉栓塞,而对于模型组而言,对照组鼠不进行颈动脉结扎而只是对动脉实现分离。用药组在构建完模型后,需要观察24小时,之后从腹腔内进行注射穿心莲内酯药物;而模型组及对照组在进行模型构建后,历经24小时,均需要注射同等量的生理盐水。2模型构建约120分钟后,对于用药组及模型组的脑部梗死的实验鼠,使用Zea Longa法来展开神经行为的系统评分。如果经过系统评分得出相应结果在1-4分范围内,则表示模型构建成功。在此结合实验目的,挑选1-3分的构建模型来展开具体的实验,在其中需要排除重大损伤或者功能严重缺损的鼠,并适当的给予增补,确保实验的延续性及一致性。3基于HE技术,对各组脑梗死实验鼠的病理进行观察,发现其变化情况。4采用Western blot方法来对各组脑梗死实验鼠来进行检测,通过检测Ser1303、NR2B以及Tyr1472等来观察蛋白等组织的表达变化。结果:1通过采用HE染色技术,发现模型组中鼠大脑皮质区严重坏死,呈现出片状,神经细胞的受损程度严重,部分神经元细胞发生紧缩现象,细胞核深染、固缩;对照组的鼠则无神经细胞的受损状况发生,其皮质细胞整体排列完整,结构稳定,形态保持正常;用药组神经细胞病理学损伤较模型组显著减轻。2 Western blot法测定实验大鼠脑细胞膜蛋白表达情况:NR2B各组的表达水平分别是:0.711±0.044、0.863±0.031、0.954±0.026、0.546±0.028、0.681±0.016;Ser1303各组的表达水平分别是:0.590±0.022、1.065±0.058、0.918±0.016、0.359±0.027、0.627±0.017;Tyr1472各组的表达水平分别是:0.872±0.016、0.935±0.007、0.967±0.010、0.452±0.012、0.792±0.006;模型组与对照组NR2B、Ser1303、Tyr1472的表达水平均增高(P<0.05);低剂量用药组与模型组相比NR2B、Ser1303、Tyr1472的表达水平均明显降低(P<0.05);高剂量用药组与模型组相比NR2B、Ser1303、Tyr1472的表达量也降低(P<0.05)。结论:1大鼠脑梗死后启动了钙超载机制损伤,且NR2B及其磷酸化位点蛋白可能参与大鼠脑梗死后抗钙超载自我保护机制。2穿心莲内酯对大鼠脑梗死具有保护性作用,机制可能与通过拮抗NMDA受体及其下游位点磷酸化起到保护作用。