本研究以东北地区两栖类的代表物种东北林蛙（Rana dybowskii）为研究对象,以大肠埃希氏菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）为特异刺激原,灭活菌刺激东北林蛙48h,优化Trizol法提取皮肤总RNA,两步法进行RT-PCR,利用Rana属皮肤抗菌肽保守区设计上游引物（Sense）,下游引物为Oligod（T）15。回收电泳谱带中100bp～750bp DNA及克隆测序,依测序结果推测抗菌肽序列并设计特异下游引物。用特异下游引物和上游引物（Sense）对cDNA进行PCR扩增及克隆测序,获得目的肽基因cDNA序列。用特异引物检测细菌刺激组和对照组抗菌肽特异表达,观察在细菌刺激下不同抗菌肽基因的表达变化趋势。 研究结果表明,优化Trizol法可有效的提取东北林蛙皮肤总RNA,在本实验条件下可识别模板量差异5倍的样品。实验获得的8条序列中有4条已确定为东北林蛙皮肤抗菌肽基因序列,且均为新发现基因,其中Brevinin-1ST基因、Temperin-ST和Dybowskin-2ST基因的表达呈现上调,且结果表明S.aureus刺激组Brevinin-1ST基因产物强度高于E.coli刺激组,Temperin-ST基因的S.aureus刺激组产物强度产物强度低于E.coli刺激组,Dybowskin-2ST基因的S.aureus刺激组产物强度产物强度和E.coli刺激组差别不明显。此次研究结果为这些基因的重组表达及其相关研究奠定了良好基础。