目的:1.建立4周龄大鼠海马脑片培养模型。2.观察缺氧对4周龄大鼠海马脑片tau蛋白的影响，以期建立拟痴呆组织模型。 方法:1.体外微孔膜插件培养海马脑片，应用倒置相差显微镜、LDH检测试剂盒、免疫荧光组织化学法及共聚焦激光扫描显微镜观察培养情况。2.标准条件培养7天后，入缺氧培养箱分别缺氧30min，1h，1.5h，2h，然后恢复标准条件培养6天，应用倒置相差显微镜观察培养情况，用免疫荧光组织化学法及共聚焦激光扫描显微镜对tau蛋白表达水平进行观察和统计分析。 结果:1.培养海马脑片逐渐变薄，细胞条带亮度逐渐减弱；培养12d内，培养液中LDH含量稳定，海马脑片存活良好；在培养过程中，神经细胞逐渐减少，星形胶质细胞逐渐增多。2.p-Tau(Ser214)蛋白与总蛋白Tau-5的荧光强度比值显示缺氧1h组在培养第13天(即缺氧第6天)比对照组明显增大(P<0.05)，Tau(Ab-214)蛋白与总蛋白Tau-5的荧光强度比值显示缺氧组在培养第13天与对照组无显著差异(P>0.05)。3.p-Tau(Ser396)蛋白，缺氧30min组的表达量稳定增加，缺氧1h组的表达量在培养第10天(即缺氧第3天)比对照组明显增多(P<0.05)，在培养第13天表达量显著减少(P<0.05)。4.p-Tau(Thr231)蛋白在培养第10天，缺氧1h组的表达量比对照组明显增多(P<0.05)，在培养第13天缺氧30min、1h组的表达量均明显增多(P<0.05)。Tau(Ab-231)蛋白在培养第10天，缺氧1h组的表达量比对照组明显增多(P<0.05)，在培养第13天缺氧30min组的表达量明显增多(P<0.05)。5.p-Tau(Thr205)蛋白，在培养第10、13天，缺氧30min、1h组的表达量比对照组均明显增多(P<0.05)。6.p-Tau(Thr181)蛋白在培养第13天缺氧30min组的表达量比对照组明显增多(P<0.05)。 结论:1.建立的4周龄大鼠器官型海马脑片培养模型可为体外研究神经系统相关疾病提供一种实验方法。2.Tau蛋白Ser214位点在缺氧1h模型中发生了过度磷酸化。3.Tau蛋白Ser396、Thr231、Thr205、Thr181位点在此缺氧模型中可能有过度磷酸化。4.缺氧30min和1h的器官型海马脑片有望成为拟痴呆组织模型。