【摘 要】
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肌球蛋白重链(MyHC)是肌肉的一个主要结构和功能蛋白。本研究根据鳜鱼MyHC基因亲水性高的区域序列，设计一对特异性引物，将鳜鱼肌球蛋白重链基因片段亚克隆到pET-32α质粒，构建重
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肌球蛋白重链(MyHC)是肌肉的一个主要结构和功能蛋白。本研究根据鳜鱼MyHC基因亲水性高的区域序列，设计一对特异性引物，将鳜鱼肌球蛋白重链基因片段亚克隆到pET-32α质粒，构建重组表达载体并转化入大肠杆菌Escherichia coli BL21中。SDS-PAGE和Western杂交检测表明，在IPTG诱导下含有重组载体的菌株可表达分子质量约40 KD的融合蛋白。诱导条件优化实验结果显示，该菌株经0.8 mmol/L IPTG诱导3 h可大量表达此蛋白。一步亲和层析纯化后，将纯化后的蛋白注射到新西兰大白兔中制备多克隆抗体。通过ELISA测试抗体，结果表明此抗体有较好的特异性。鳜鱼MyHC基因表达的研究为深入研究肌球蛋白重链的功能特性及其对肉质性状的影响奠定基础，为提高鱼类肉质提供重要的理论基础和技术支持。
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