BMP-2在小鼠屈光发育及形觉剥夺性近视形成中的作用

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目的:研究C57BL/6小鼠形觉剥夺性近视(form-deprivation myopia, FDM)模型中,视网膜及巩膜中BMP/TGF-β信号通路中BMP-2的表达情况,探讨其在正常屈光发育及FDM形成中的作用。方法:选取98只21d的C57BL/6小鼠,以随机数字表法,随机分为形觉剥夺组(48只)和同龄对照组(48只),另取2只正常小鼠用于免疫荧光染色。形觉剥夺组和同龄对照组又分别分为FDM7d组、FDM21d、FDM28d,每组各16只。实验组用半透明的眼罩缝合在小鼠右眼周围以建立FDM模型,左眼则作为自身对照眼,根据遮盖时间7d、21d和28d分别建立不同时间点动物模型,用带状光剪影验光和电子游标卡尺分别检测每组小鼠形觉剥夺前后屈光度数的变化和眼轴长度的改变,免疫荧光观察正常小鼠视网膜及巩膜中BMP-2的表达,苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠后极部巩膜组织的形态变化,造模后,分别于7d、21d和28d取小鼠的视网膜及巩膜组织,用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)和免疫组化分别检测各组小鼠视网膜和巩膜中BMP-2 mRNA及其蛋白的变化。结果:FDM7d时,实验眼屈光度和眼轴长度与自身对照眼及正常对照眼相比,无明显差异(P>0.05);FDM21d后,与自身对照眼及正常对照眼相比,实验眼诱导出(-4.65D±0.13)D的相对近视,眼轴延长了(16±12)μm;随着剥夺时间的延长,实验眼逐渐向近视方向漂移,FDM28d后,实验眼诱导出(-7.40D±0.27)D的相对近视,同时眼轴长度增加了(21±13)μ m,与自身对照组和正常对照相比较,组间差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色观察巩膜形态学变化,可见实验眼巩膜呈明显变薄,胶原纤维排列紊乱。免疫荧光结果显示BMP-2在视网膜各层均有表达,且主要分布在内核层;均匀的分布在巩膜成纤维细胞的细胞膜上;QRT-PCR和免疫组化结果显示视网膜和巩膜中BMP-2 mRNA和蛋白的表达水平呈明显下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:正常小鼠屈光发育呈远视化发展,BMP-2未能参与小鼠远视的屈光发育;形觉剥夺性近视诱导过程中,BMP-2的表达随着剥夺时间呈下调趋势,提示BMP-2在近视形成过程中具有保护作用,可能通过影响成纤维细胞增殖及胶原纤维的合成来参与FDM的合成;可能的机制:形觉剥夺可能通过影响视网膜BMP/TGF-β信号通路限制BMP-2对巩膜重塑的保护性作用而形成近视。
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