目的：本课题研究蕨麻多酚对缺氧损伤的血管内皮细胞的保护作用，并对其可能的作用机制进行探讨。　　 方法：　　 1.人脐静脉血管内皮细胞株(EA.hy926)的培养：按常规方法复苏后接种于40ml培养瓶中，在37℃、5％CO2，饱和湿度条件下，使用含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基(含青霉素1×105U/L，链霉素100mg/L)培养。至细胞生长成单层，进行3次传代后用于实验。　　 2.通过MTT法，LDH（乳酸脱氢酶）活性检测与台盼蓝染色法确定适宜的缺氧时间，建立细胞缺氧损伤模型。　　 3.将生长状态良好的内皮细胞，随机分为正常对照组，缺氧损伤模型组，蕨麻多酚高、中、低剂量组(2.4mg/ml、1.2mg/ml、0.6mg/ml)和复方丹参阳性药物组（DSP滴丸组，2.4mg/ml）（缺氧同时加入相应药物）。通过MTT法检测各组细胞代谢活力，比色法检测细胞外LDH活性。　　 4.通过H.E染色法观察各组细胞形态的变化。　　 5.用黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性，用硫代巴比妥酸比色法检测细胞内脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量。　　 6.检测各组细胞外总一氧化氮合酶(NOS)活性，NO含量和内皮素-1(ET-1)含量。　　 7.应用RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）技术检测各组HIF-1α、eNOS、iNOS及ET-1 mRNA的表达水平。　　 8.应用Western Blot（免疫印迹）技术检测各组HIF-1α、eNOS蛋白的表达水平。　　 结果：　　 1.在倒置显微镜下观察可见，正常培养的血管内皮细胞生长状态好，呈圆形、长梭形或多角形紧密贴壁，鹅卵石状镶嵌铺满底层，折光性强，分裂相多。　　 2.蕨麻多酚对内皮细胞缺氧损伤的保护作用：(1)MTT实验：缺氧损伤模型组细胞与正常对照组相比，其代谢活力下降(P＜0.01)；蕨麻多酚各剂量组、DSP滴丸组细胞与缺氧损伤模型组相比，其代谢活力均明显提高(P＜0.01)。(2)H．E染色：缺氧损伤细胞间隙增大，联系减少，细胞核被深染，蕨麻多酚干预后，细胞损伤减轻。(3)LDH活性检测：缺氧损伤模型组与正常对照组相比，细胞外LDH活性明显升高(P＜0.01)；蕨麻多酚各剂量组、DSP滴丸组与缺氧损伤模型组相比，细胞外LDH活性均明显降低(P＜0.01)。　　 3.蕨麻多酚对缺氧损伤的血管内皮细胞保护作用的机制研究：(1)生化指标检测：缺氧损伤模型组与正常对照组相比，细胞内SOD活性下降(P＜0.01)；蕨麻多酚各剂量组、DSP滴丸组与模型组相比，细胞内SOD活性(高、低剂量组P＜0.01，中剂量组P＜0.05)显著升高。各实验组细胞内MDA含量无显著性差异(P＞0.05)；缺氧损伤模型组与正常对照组相比，总NOS活性增加(P＜0.01)，NO含量增加(P＜0.01)，ET-1含量增加（P＜0.01）；蕨麻多酚各剂量组、DSP滴丸组与缺氧损伤模型组比较，NO含量均显著减少(P＜0.01)，NOS活性(P＜0.01)和ET-1含量均降低（P＜0.01）。(2)RT-PCR:缺氧损伤模型组与正常对照组相比，HIF-1αmRNA、iNOS mRNA、ET-1 mRNA表达水平明显升高（P＜0.01），而eNOS mRNA表达水平明显降低(P＜0.01)。蕨麻多酚各剂量组、DSP滴丸组与缺氧模型组相比，HIF-1αmRNA表达水平明显降低(P＜0.01)；蕨麻多酚高、中剂量组、DSP滴丸组的eNOS mRNA表达水平升高(P＜0.01)；蕨麻多酚高剂量组的iNOS mRNA表达水平降低（P＜0.01）；蕨麻多酚高、中剂量组、DSP滴丸组的ET-1 mRNA表达水平降低(P＜0.01)。(4)Western Blot:缺氧损伤模型组与正常对照组细胞相比，HIF-1α蛋白表达升高（P＜0.01），eNOS蛋白表达降低(P＜0.01)。蕨麻多酚各剂量组和DSP滴丸组与缺氧损伤模型组相比，HIF-1α蛋白表达降低（高剂量组P＜0.05;中、低剂量组，DSP滴丸组P＜0.01），eNOS蛋白表达均升高（P＜0.01）。　　 结论：蕨麻多酚可以减轻缺氧诱导的血管内皮细胞的损伤，增强细胞代谢活力，降低LDH的外漏量，对血管内皮细胞缺氧损伤具有保护作用。其作用机制可能是：提高缺氧损伤细胞内SOD的活力；减少NO的产生，降低细胞内ET-1的外漏量，维持NO/ET-1的平衡，从而改善内皮功能。