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野生型p53基因是重要的肿瘤抑制基因,它抑制肿瘤细胞增殖、参与肿瘤细胞凋亡、分化、修复等生命活动,是进行恶性肿瘤基因治疗的重要候选基因之一.为探讨野生型p53基因过表达诱导不同转移潜能肺腺癌细胞凋亡机制.本研究选择同一母系来源的一对高、低转移肺腺癌细胞系AGZY83-a和Anip973,以及同样具有高低转移潜能的肺腺癌细胞系L-18和SPC-1-A,进行腺病毒介导的野生型p53基因感染后肺癌细胞体外增殖能力分析,应用mRNA差异展示和Northern blot方法,分离、鉴定p53基因感染前后各细胞系差异表达的相关基因.研究结果发现,野生型p53基因过表达诱导体外培养的肺腺癌细胞增殖受抑并发生调亡,凋亡反应时程与细胞转移潜能相关.mRNA差异展示实验共得到差异表达cDNA片段个,对其中27个差异片段进行克隆测序,获得已知基因14个,5个同源性较好的EST片段和8个无同源序列的cDNA片段.进一步分析确认,有7个已知基因与野生p53基因诱导的细胞凋亡有关,它们是:(1)转录因子—锌指蛋白ZNF266、CA150和cdc2 kinase substrate PK161;(2)伴侣分子:ORP150;(3)离子通道蛋白:annexin A2、CLIC3;(4)氧化还原酶:UQCRH.其中annexinA2、ORP150和CLIC3基因在转移能力不同的细胞系中表达差异.八个不同转移能力的肺腺癌细胞系中ORP150基因和annexin A2基因和annexin A2基因的Northern blot研究发现,annexin A2基因与肺腺癌转移相关.应有RT-PCR方法,进一步探讨在野生型p53基因不同感染时间(24h、48h、72h、96h)内高低转移细胞系Anip973和AGZY83-a中ORP150基因和凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、caspase-12、NK-kB的表达情况.结果发现,野生型p53基因过表达引起OPR150基因在低转移细胞系AGZY83-a中持续长时间高表达,其表达的强度与持续时间均较高转移细胞系Anip973显著.ORP150基因的持续高水平表达可能与低转移细胞系对抗细胞凋亡有关;野生型p53基因诱导后,caspase-12和NF-kB基因高表达说明,内质网应激反应参与了野生型p53基因诱导的细胞凋亡的调控.p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53p53