【摘 要】
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目的:应用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)对急性腹腔感染患者和健康患者的血清和尿液进行检测,找出急性腹腔感染患者与健康患者之间差异性代谢产物,进而寻找出与急性腹腔感染有关的生物标记物。方法:1、实验分组:根据有无腹腔感染分为:腹腔感染组(疾病组)与健康组(健康组)。2、样本处理:将样本取出室温下解冻,加入乙晴、高速离心(14000rpm,5min),取上清液供高效液相色谱质谱联用仪监测分析。3
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目的:应用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)对急性腹腔感染患者和健康患者的血清和尿液进行检测,找出急性腹腔感染患者与健康患者之间差异性代谢产物,进而寻找出与急性腹腔感染有关的生物标记物。方法:1、实验分组:根据有无腹腔感染分为:腹腔感染组(疾病组)与健康组(健康组)。2、样本处理:将样本取出室温下解冻,加入乙晴、高速离心(14000rpm,5min),取上清液供高效液相色谱质谱联用仪监测分析。3、色谱分析:应用液相色谱-质谱仪对样本进行检测,得到实验组与对照组血清和尿液代谢图谱和相关数据进行数据处理。4、数据处理:进一步通过MarkerView软件对原始数据提取后经过主成分分析、利用MetaboAnalyst软件进行t-检验、偏最小二乘判别分析、用BRBarray软件做支持向量机判别分析,将数据带入HMDB并从中找出经统计分析后得出质核比的差异性代谢产物。后将数据导入MetaboAnalyst网站进行聚类分析,并利用SPSS 23软件绘制ROC曲线等统计学手段对得到的实验数据进行分析,找到疾病组和健康组患者之间的代谢图谱差异,找出可能的差异性代谢产物。结果:1、在血清样本的研究中,通过主成分分析、t检验、偏最小二乘判别分析、支持向量机判别分析等方法筛选出具有差异的代谢产物,将筛选出的代谢产物在HMDB数据库中进行结构鉴定,正负离子模式下一共找出中16个差异性代谢产物。最后绘制ROC曲线,找出9个重要差异代谢产物。2、在尿液样本的研究中,通过主成分分析、t检验、偏最小二乘判别分析、支持向量机判别分析等方法筛选出具有差异的代谢产物,将筛选出的代谢产物在HMDB数据库中进行结构鉴定,正负离子模式下一共找出11中种差异性代谢产物。最后绘制ROC曲线,找出2种重要差异代谢产物。3、我们通过代谢组学得出两组血液样本的1-差异代谢产物曲线下面积最大值为0.96,而两组血清样本PCT的曲线下面积为0.89,LysoPC(0:0/18:2(9Z,12Z))的1-曲线下面积值最大。结论:1、血液的代谢图谱分析中发现16种差异代谢产物,经过ROC曲线分析,根据曲线下面积选取9种重要差异代谢产物,这些代谢产物对感染组患者与健康人有很好的区分能力,可能为潜在的生物标志物。2、尿液的代谢图谱分析中发现11种差异代谢产物,经过ROC曲线分析,根据曲线下面积选取2种重要差异代谢产物,这些代谢产物对感染组患者与健康人有很好的区分能力,可能为潜在的生物标志物。3、我们通过代谢组学得出两组血液样本的1-差异代谢产物曲线下面积最大值为0.96,而两组血液样本PCT的曲线下面积为0.89,LysoPC(0:0/18:2(9Z,12Z))的1-曲线下面积值最大。
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