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第一部分miR-223调控子宫内膜上皮细胞IGF-1R的表达目的：构建miR-223过表达慢病毒载体,通过转染RL95-2上皮细胞系明确miR-223在子宫内膜上皮细胞中的靶基因。方法：利用TargetScan5.1获得miR-223的潜在靶基因信息；采用慢病毒转染体系上调RL95-2上皮细胞系中miR-223的表达,分别用real-time PCR、Western Blot检测预测靶基因mRNA和蛋白表达水平；构建miR-223的靶标克隆载体,利用双荧光素酶报告基因载体确定靶基因。结果：(1)根据TargetScan5.1预测得到miR-223的潜在靶基因IGF-1R、FOXO1、E2F1、 IKKα;(2)过表达RL95-2上皮细胞中miR-223后IGF-1R、FOXO1、E2F1、IKKα的mRNA表达均无改变,但是IGF-1R的蛋白表达明显下降；(3)双荧光素酶报告基因证实miR-223直接调节IGF-1R的表达。结论：miR-223作用在IGF-1R的3’UTR调节子宫内膜上皮细胞IGF-1R的蛋白表达。第二部分miR-223和IGF-1R在人类子宫内膜的表达规律目的：通过检测月经周期不同时期子宫内膜miR-223和IGF-1R的表达,观察人类子宫内膜上miR-223和IGF-1R的表达趋势。方法：利用Real-time PCR检测增生中期和分泌中期子宫内膜miR-223和IGF-1R mRNA的表达水平,Western Blot和免疫组化检测增生中期和分泌中期子宫内膜IGF-1R的蛋白表达水平及细胞定位。结果：(1)Real-time PCR结果显示miR-223在分泌中期子宫内膜的表达明显低于增生中期子宫内膜,而IGF-1R的mRNA在两组子宫内膜上的表达未见明显改变；(2)Western Blot结果显示IGF-1R蛋白在分泌中期子宫内膜上的表达明显高于增生中期子宫内膜；(3)免疫组化结果显示IGF-1R主要表达在子宫内膜上皮细胞上,且分泌中期子宫内膜上的表达明显高于增生中期子宫内膜。结论：miR-223和IGF-1R在人类子宫内膜上的表达呈现负相关,进一步证实了细胞实验的结论。第三部分过表达miR-223抑制胚胎的植入目的：通过体外滋养细胞球侵入模型和在体胚胎植入模型研究miR-223对胚胎植入的影响。方法：利用Bewo滋养细胞和RL95-2上皮细胞系构建内膜-滋养细胞球相互作用的体外侵入模型,观察Bewo细胞球在单层内膜上皮细胞上的侵入情况；建立小鼠妊娠模型,使用miR-223激动剂干预小鼠子宫内膜miR-223的表达,观察miR-223对胚胎植入的影响。结果：(1)在Bewo细胞球和RL95-2上皮细胞共培养体系中,过表达miR-223组Bewo细胞球的侵入率明显低于对照组,添加IGF-1可逆转miR-223对Bewo细胞球的抑制效果；(2)小鼠宫角注射miR-223激动剂干预后小鼠着床胚胎数明显下降。结论：体内及体外实验结果均证实了miR-223抑制胚胎着床,且这一抑制效应可能是通过调节IGF-1R实现的。