目的：为了明确碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)在肉鸡养殖场内传播的方式，我们制定一个长期对青岛地区某肉鸡场CRE的监测计划。通过对CRE的流行情况和耐药性进行分析，确定可能存在的传播方式，为减少CRE的传播，消除公共卫生安全隐患和保障人类生命健康提供科学依据。
　　方法：2015年9月至2018年9月期间，在青岛地区某肉鸡养殖场内采集不同来源样品10次，并进行场内CRE流行情况、耐药性和传播模式的分析。通过对碳青霉烯低敏感菌株的分离鉴定和常见碳青霉烯耐药基因的筛查，确定碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌场内流行情况；根据CLSI标准和EUCAST标准对分离菌株进行药敏试验并进行耐药性分析；通过PFGE对碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌进行分型，推测可能存在的传播方式；最后通过S1-PFGE、Southern-blot、接合转移和二代测序对传播模式进行分析。
　　结果：从718份样品中，总计分离到195株(分离率为27.3%)携带blaNDM细菌，其中肠杆菌科细菌186株(分离率为26%)，非肠杆菌科细菌9株(分离率为1.3%)，未分离到携带其他碳青霉烯耐药基因的菌株。对186株产NDM型碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(NDM-CRE)进行blaNDM基因亚型的分析，发现携带blaNDM-1的菌株为13株，blaNDM-5为98株，blaNDM-9为65株和blaNDM-17为10株。
　　药敏试验结果显示，186株NDM-CRE对所有β-内酰胺类抗生素(除氨曲南外)耐药率达到97.6%以上，超过90%的NDM-CRE对氟苯尼考(94.7%)和四环素(94.7%)耐药，78.1%的菌株对庆大霉素耐药，54.5%的菌株对氨曲南耐药。除雷氏普罗威斯登菌外，19.8%的菌株对多黏菌素E耐药，未发现对替加环素耐药的菌株。
　　PFGE分型结果显示，144株分型成功的大肠杆菌共获得34个PFGE谱型，包括17个克隆传播谱型(n=127)和17个非克隆传播谱型(n=17)。菌株数量最多的克隆传播谱型为谱型31(n=21)，其次是谱型38(n=18)和谱型28(n=14)。
　　S1-PFGE、Southern-blot和接合转移试验结果显示，试验菌株的blaNDM耐药基因均定位于质粒上，且均可发生接合转移；质粒图谱表明，携带blaNDM-5和blaNDM-17的质粒均为IncX3质粒，6株携带blaNDM-9的质粒均为IncB/O/K/Z质粒。
　　核心SNP进化树和ST分型表示，同一克隆菌株之间差异较小，ST48、ST206和ST746型大肠杆菌是NDM克隆传播的主要宿主，且宿主在克隆传播过程中能够稳定的遗传blaNDM耐药基因。
　　结论：本研究在该肉鸡场发现了可能被人忽视的NDM-CRE的克隆传播模式，发现了肉鸡养殖场内存在NDM水平传播和克隆传播共存在的现象，这种模式会加快NDM-CRE在肉鸡场内的传播速度。NDM-CRE大量繁殖，带来的是耐药细菌和耐药基因的残留，可能会成为人类生命健康的潜在威胁，我们有必要控制NDM-CRE在肉鸡养殖场内的传播，并杜绝向场外传播，消除NDM在肉鸡场内的残留，以保障公共卫生安全。