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腮腺炎病毒（MuV）同其他囊膜病毒相似，在融合蛋白（F）中具有两个七肽重复序列结构域（HR）。有关其他囊膜病毒F蛋白的研究表明，HR区在F蛋白介导的病毒侵染中起着至关重要的作用，在结合蛋白或结合亚基的协助作用下，两段HR结构域的构像发生变化形成热稳定的富含α螺旋的发夹异源三聚体结构，并由此得到一个共同的融合机制。但目前并不清楚MuV是否有类似于其他囊膜病毒的侵染机制。 本研究构建了HR区（HR1、HR2和2-Helix）的重组载体，并在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达了HR1、HR2和2-Helix。GST融合的HR1、HR2和2-Helix单体蛋白都以可溶形式表达，利用亲和层析及凝胶过滤层析纯化获得了高纯度的目的蛋白。经pull-down实验，初步证实HR1和HR2之间存在相互作用，HR1和HR2的混合物在凝胶过滤层析中以聚体形式存在。HR1／HR2和2-Helix的化学交联实验表明，等摩尔的HR1和HR2可形成异源三聚体，其中2-Helix蛋白随着交联剂浓度的增加，呈现明显的单体和聚体的浓度梯度；HR1／HR2蛋白由于浓度较低虽未见清晰的单体和聚体的浓度梯度，但仍可看到明显的异源三聚体。凝胶过滤层析也证实了这一结果，两者在同一位置出峰，且在分子量为52 kDa和14.4 kDa的出峰位置之间，显示其以聚体形式存在。质谱分析结果显示，2-Helix蛋白分子量为11.7 kDa，HR1为7.1 kDa，HR2为4.7 kDa，2-Helix和HR1／HR2三体分子量分别为35.1 kDa和35.4 kDa，与凝胶过滤层析结果相对应。圆二色谱分析结果表明，单独的HR1以α螺旋结构存在，而HR2则以无规卷曲存在，当两者等摩尔混合后，α螺旋含量明显增加。2-Helix同样具有典型的α螺旋结构。2-Helix和HR1／HR2三体相当稳定，Tm达到76℃，而且这种结合是特异的，高温变性后的蛋白经低温长时间放置后能够大部分复性，仍然呈现较高含量的α螺旋结构。用晶体生长条件筛选试剂盒（Crystal Screen Ⅰ and Ⅱ，Hampton Research，Riverside，CA，USA）对2-Helix蛋白晶体的生长条件进行初选，经过优化最后在15％PEG 8000、1.0 M Li2SO4缓冲液长出可以进行衍射的晶体。通过应用程序AMORE，以SV5 F蛋白N1／Cl三聚体晶体结构（PDB code：1SVF）为模型，利用分子置换的方法对2-Helix的晶体结构进行解析，得到了与SV5、RSV和NDV核心结构相似的六螺旋束，显示MuV可能具有与上述蛋白相似的融合侵染机制。