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目的：研究镁离子对大鼠P2X4受体介导的ATP-激活电流(ATP-activated current, IATP)的调制及作用位点。方法：应用基因定点突变技术将大鼠P2X4受体Asp280分别突变成谷氨酰胺、谷氨酸或者使Asp280缺失。将野生型和突变型P2X4受体的cDNA在体外转录成cRNA，并通过显微注射技术，将cRNA注入去滤泡膜的爪蟾卵母细胞中进行表达，用双电极电压钳技术记录细胞外液镁离子对IATP的影响。结果：（1）在注入了P2X4受体cRNA的爪蟾卵母细胞外加ATP，可诱发IATP；（2） PPADS和suramin对IATP无显著性影响；（3）0.510mmol/L的镁离子抑制IATP，且具有浓度依赖性及可逆性，半效抑制浓度（IC50）为（1.24±0.07） mmol/L，胞外的镁离子被冲洗后，IATP可恢复到对照值；（4）1mmol/L的镁离子使IATP量-效曲线右下移，半数有效浓度（EC50）无显著性改变，但最大效应电流（Emax）减小；（5）镁离子时间依赖性地抑制IATP，用镁离子预先孵育卵母细胞80s后再加ATP，对P2X4受体介导的IATP抑制效应达最大；（6）膜电位的改变不影响镁离子对IATP的抑制效应；（7） P2X4受体Asp280被突变成不带电荷的谷氨酰胺后，100μmol/L ATP诱发的IATP幅值和相同浓度的ATP诱发野生型P2X4受体介导的IATP幅值相比明显降低，仅为对照值的（4.12±0.15）%；将Asp280突变成带负电荷的谷氨酸后，IATP幅值和对照值相比无显著性差异；（8）当Asp280缺失后，100μmol/LATP诱发的IATP明显增大，胞外加0.510mmol/L的镁离子对相应的IATP无显著性影响。结论：（1）镁离子可能通过作用于P2X4受体Asp280而抑制P2X4受体介导的IATP；（2）镁离子抑制P2X4受体介导的IATP可能是镁离子治疗疼痛的机制之一。目的：研究酒精对大鼠颈上神经节P2X4受体介导的ATP-激活电流(ATP-activated current,IATP)的调制及机理。方法：将大鼠颈上神经节P2X4受体表达在非洲爪蟾卵母细胞中，应用双电极电压钳技术记录P2X4受体介导的IATP及酒精对IATP的影响。结果：（1）1500mmol/L的酒精抑制P2X4受体介导的ATP-激活电流，随着酒精浓度的增加，对IATP的抑制作用越明显。这种抑制效用是可逆的，当细胞外的酒精被冲洗后，IATP可恢复到对照值；（2）60mmol/L的酒精使P2X4受体介导的IATP量-效曲线平行右移，最大电流（Emax）不变，半数有效浓度（EC50）增大，浓度大于500mmol/L的酒精不能使EC50继续增大；（3）酒精对ATP-激活电流的抑制不具有电压依赖性，且不改变翻转电位；（4）1mmol/L的镁离子和10mmol/L的酒精分别能抑制10μmol/L ATP诱发的电流，抑制率分别为（39±3.8）%和（19±1.6）%，当两者同时加入时（两者的终浓度不改变）对ATP-激活电流的抑制呈现叠加效应。结论：（1）酒精对表达在非洲爪蟾卵母细胞上大鼠颈上神经节P2X4受体介导的IATP具有抑制效应，这种抑制效应具有浓度依赖性、可逆性，无电压依赖性，可能是酒精通过对P2X4受体的变构调节实现的；（2）酒精和镁离子在P2X4受体胞外环上可能具有不同的调制位点。