ataxin-3蛋白的互作蛋白基因克隆和细胞、组织定位及SCA6、SCA7和AT的疾病基因突变研究

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第一部分 ataxin-3蛋白的互作蛋白基因克隆和细胞、组织定位研究遗传性脊髓小脑型共济失调(Spinocerebellar ataxia,SCA)是一类常见的神经系统遗传病,分子遗传学研究发现已定位了29种基因型,克隆了15个疾病基因,其中SCA3/MJD基因型最常见.ataxin-3蛋白是SCA3/MJD致病基因MJD1编码的含有多聚谷氨酰胺(polyglutamine,polyGln)的胞浆蛋白,生理功能尚不清楚.该文运用分子生物学技术和生物信息学方法,首先完成了A3IP基因现有序列全长阅读框的cDNA克隆及序列拼接,证实了现有序列的完整阅读框;获得了A3IP基因的部分基因组结构.通过免疫组织细胞化学实验初步证实了A3IP可在人神经系统各组织(大脑皮质、小脑、肌肉、周围神经)和人其它组织(肝脏、肾脏)表达并定位于各组织细胞胞浆.第二部分 SCA6、SCA7和AT的疾病基因突变研究一、SCA6、SCA7的疾病基因突变研究应用聚合酶链反应(PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术结合DNA测序,对120个SCA家系中210例SCA患者和47例散发SCA患者及50名健康人进行了CACNA1A和SCA 7基因内CAG三核苷酸重复序列分析.SCA6两个家系的临床特点为相对晚发的单纯性小脑性共济失调;SCA7一个家系的临床特点为伴有视网膜色素变性的小脑性共济失调.二、AT的疾病基因突变研究对两个AT家系的2例患者、其父母以及50名健康人进行了ATM基因的突变分析.两个AT家系的临床特点为儿童期起病的进行性小脑性共济失调,眼、皮肤毛细血管扩张以及免疫功能缺陷导致的反复感染;血清AFP值高于正常,免疫球蛋白IgA、IgG值低于正常;头颅MRI显示小脑萎缩.首次作出了中国人AT患者的基因诊断.
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