【摘 要】
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凡纳滨对虾作为最主要的水产养殖经济物种,高密度集约化的生产过程中病害泛滥等问题日益突出,由于缺乏适应性免疫,凡纳滨对虾只能依赖先天免疫系统应对病原入侵。本研究首先采用注射LPS（脂多糖）的方法,通过TMT蛋白质组学分析研究血细胞内信号通路的免疫响应机制,并采用RNA干扰技术深入探究JAK/STAT信号通路对免疫系统的调控机制。结果表明,1)LPS刺激下,共有150个蛋白显著差异表达,这些蛋白与免疫
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凡纳滨对虾作为最主要的水产养殖经济物种,高密度集约化的生产过程中病害泛滥等问题日益突出,由于缺乏适应性免疫,凡纳滨对虾只能依赖先天免疫系统应对病原入侵。本研究首先采用注射LPS（脂多糖）的方法,通过TMT蛋白质组学分析研究血细胞内信号通路的免疫响应机制,并采用RNA干扰技术深入探究JAK/STAT信号通路对免疫系统的调控机制。结果表明,1)LPS刺激下,共有150个蛋白显著差异表达,这些蛋白与免疫信号通路、细胞免疫、体液免疫、细胞凋亡、蛋白质的合成转运、脂质转运和能量代谢等生理过程密切相关。其中,LPS刺激下,凡纳滨对虾血细胞内的JAK/STAT信号通路正调控抗菌活力等显著增强,c AMP-PKA信号通路和MAPK信号通路正调控吞噬活性等显著增强,PKC信号通路和Ras信号通路正调控凝集活性等显著增强。2)在此实验的基础上,我们采用RNA干扰技术,探究在LPS刺激下JAK/STAT信号通路对凡纳滨对虾免疫系统的调控机制。结果表明,在无干扰的LPS注射组,JAK/STAT信号通路基因的表达水平、血细胞数量、血细胞吞噬活力、酚氧化酶原激活系统活力、凝集活力、溶菌和抗菌活力以及相关基因的表达量均显著上调并远高于对照组水平。然而,STAT基因干扰48h后,血细胞中免疫基因的表达水平显著下调,免疫因子活性以及抗氧化能力显著下调,均远低于对照组水平,此时再进行LPS刺激,6h后,上述免疫指标远低于对照组水平,12h显著上调至最大但仍远低于未干扰的LPS组同期水平。因此,我们认为JAK/STAT信号通路通过正调控血细胞数量、血细胞吞噬能力、血浆凝集活性、酚氧化酶原激活系统活力,溶菌活力、抗菌活力以及抗氧化水平参与凡纳滨对虾免疫调控机制抵御病原入侵。
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