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疫苗是防治传染病的有效手段,作为一种相对便宜且长效的防治措施,研制出血吸虫病的疫苗一直是科学家们追求的目标。血吸虫病疫苗的研究经历了从死疫苗、致弱活疫苗、亚单位疫苗到基因工程疫苗的探索过程。核酸疫苗是血吸虫疫苗研究的重要内容。现阶段研制的血吸虫核酸疫苗候选分子所诱导的保护力比较弱,保护不完全,因此有必要提高疫苗分子的免疫诱导力和寻找新的疫苗候选分子。1.本研究是通过由日本血吸虫cDNA文库筛选出的新基因(SjIR3)与真核表达载体pCDNA3.0构建出重组质粒SjIR3/pC,并以生理盐水(100μl)、空白质粒pCDNA3.0(50μg)为对照免疫KM小鼠(每组18只),免疫方案是0-2-4-6,每次免疫前及攻击感染前于尾静脉采血进行ELISA实验检测抗体滴度。末次免疫后2w,各组剖杀任意6只小鼠取脾细胞,分别用ConA或rSjIR3重组蛋白诱导,MTT法检测淋巴细胞增殖。各组余下小鼠经腹部感染日本血吸虫尾蚴40±1条,45d后宰杀,观察实验组小鼠的减虫率和减卵率。其结果显示,SjIR3/pC可诱导小鼠产生较高抗体水平(0.78±0.05),ConA或rSjIR3重组蛋白诱导淋巴细胞增殖结果分别为0.57±0.02、0.68±0.01,减虫率和减卵率分别是29.4%、36.6%。2.首次构建了鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)与血吸虫基因的共表达载体(SjIR3-GMCSF/pC),并设计了生理盐水(100μl)、空白质粒pCDNA3.0、SjIR3/pC、mGM—CSF/pC和SjIR3-GMCSF/pC(50μg)五组小鼠实验,其免疫方案、攻击感染、检测方法同前。结果显示,SjIR3/pC组与SjIR3-GMCSF/pC诱导小鼠产生的抗体水平分别为0.78±0.04、0.91±0.03;ConA或rSjIR3重组蛋白诱导淋巴细胞的转化率明显增加,其A570分别为0.56±0.07和0.68±0.05、0.56±0.07和0.77±0.04;减虫率和减卵率分别是39.81%、34.75%和33.96%、28.43%。结论:SjIR3 DNA疫苗能够诱导受攻击感染的小鼠产生体液免疫和细胞免疫而具有部分抗攻击感染的免疫保护作用。mGM-CSF可增强SjIR3DNA疫苗诱导小鼠产生的体液免疫和细胞免疫应答和抗攻击感染的免疫保护作用。SjIR3 DNA疫苗免疫诱导家畜等产生的免疫应答和抗攻击感染的保护效果值得进一步研究,SjIR3 DNA疫苗可能成为血吸虫“鸡尾酒疫苗”的组成成分。