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吗啡是临床上常用的有效镇痛药物,但是长期使用会导致镇痛作用的耐受和药物成瘾,从而严重限制了其应用。药物成瘾是一种慢性的、复发性的疾病,成瘾记忆则被认为是一种盗用了脑内正常奖赏通路而形成的畸形记忆。戒毒后的复吸是目前临床上迫切需要解决的问题,而药物成瘾记忆的干预,则可能成为防治复吸的有效方法。干预药物成瘾记忆有两种手段,一种是针对长期记忆相关靶点的药理学方法,另一种是行为学干扰。AMPA受体介导的突触可塑性与学习记忆密切相关,在药物成瘾中的作用也受到越来越多的关注。本研究应用大鼠吗啡自身给药模型,观察了静脉注射GluR2-3Y这种能特异地抑制含有GluR2亚基的AMPA受体内吞的小肽对大鼠的成瘾行为的影响,并检测了相关的脑区GluR2含量和伏核壳区(shell)的长时程抑制(Long-Term Depression,LTD)的变化。此外,本研究在吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱(Conditioned Place Preference,CPP)模型中,通过行为本身来干扰成瘾记忆,检验了在记忆提取后进行消退训练对成瘾药物相关记忆的影响,以及在记忆提取后间隔不同的时间进行消退训练的效果。 本研究工作发现: 1.与没有经过任何处理的对照组相比,吗啡自身给药建立后大鼠伏核突触膜部位GIuR2的含量升高,而海马突触膜部位的GluR2的含量则降低;与对照组相比,吗啡自身给药消退后与重建后大鼠伏核与海马突触膜部位GluR2的含量均显著降低。上述结果提示在吗啡自身给药的不同阶段,大鼠脑内不同核团的突触膜部位GluR2的含量有不同的变化; 2.吗啡自身给药行为消退后大鼠的觅药行为可以被吗啡多次诱导重建,这与人类成瘾后反复复吸相类似; 3.在大鼠吗啡自身给药建立后的消退阶段,每天在实验开始前一个小时颈静脉注射GluR2-3Y或对照肽GluR2-3S,连续注射19天。实验结果表明GluR2-3Y不能影响吗啡自身给药建立后的消退过程,而且不影响随后进行的吗啡自身给药的重建; 4.在大鼠吗啡自身给药的第一次重建前一个小时,静脉一次注射GluR2-3Y不能抑制第一次吗啡自身给药的重建,但是可以抑制后续的第二次和第三次吗啡自身给药的重建。这一结果提示静脉一次注射GluR2-3Y对大鼠觅药行为的重建具有一种延迟的、长期的抑制效应; 5.在大鼠吗啡自身给药的第一次重建前,一次静脉注射GluR2-3Y或GluR2-3S,然后在第三次重建前取脑,检测伏核壳区(shell)的LTD水平。结果证实经GluR2-3Y处理后大鼠伏核壳区的LTD水平恢复到没有经过任何处理的对照组大鼠的水平,而对照肽GluR2-3S处理组大鼠LXD依然受损,提示GluR2-3Y对多次重建的抑制作用可能是通过其调节伏核壳区突触可塑性来实现的: 6.在吗啡诱导的大鼠CPP模型中,与自然戒断(戒断组)和测试消退(测试消退组)相比,训练消退(训练消退组)能更快达到消退标准,但是依然可以完成吗啡诱导的CPP重建,并且可以自发恢复: 7.在大鼠吗啡CPP的消退过程中,采用在CPP测试(用来提取成瘾记忆)结束后10 min、2 h和12 h进行盐水训练(分别称为10 min组、2 h组和12 h组)的消退方法消退10/14天,结果发现10 min组大鼠的CPP可以消退,并且消退后吗啡诱导的CPP的重建受到抑制,而2 h组和12 h组的消退无法完成,表明10 min组有更好的消退效果,提示CPP测试提取成瘾相关记忆的再巩固被随后的盐水训练消退所干扰,而且这种干扰作用具有时间间隔依赖的特点; 8.在吗啡诱导的大鼠CPP的消退过程中,采用在盐水训练结束10 min后进行CPP测试(称为10 min逆转组)的消退方法,吗啡诱导的大鼠CPP的消退被抑制; 9.在吗啡诱导的大鼠CPP的消退过程中,采用CPP测试结束10 min后进行第二次CPP测试的消退方法,CPP能完成消退并且与10 min组相似,吗啡诱导的大鼠CPP重建同样被抑制。 本论文发现静脉一次注射GluR2-3Y不能明显抑制吗啡自身给药的第一次重建,但是可以抑制吗啡自身给药的第二次和第三次重建,提示静脉一次注射GluR2-3Y对吗啡自身给药的重建具有一种延迟的、长期的抑制效应,这种抑制作用可能是由于GluR2-3Y干扰了重建引起的成瘾记忆的再巩固。此外,本论文发现记忆提取后盐水训练消退可以时间间隔依赖地抑制大鼠吗啡CPP的重建。以上实验结果表明,GluR2可以作为药理学干扰成瘾记忆的一个靶点,而利用行为学方法干扰记忆的再巩固也能够抑制复吸。以上研究结果为研究药物成瘾的神经机制提供了新的资料,为临床上治疗阿片成瘾者的复吸提供了新的思路。