研究背景和目的:骨肉瘤（osteosarcoma,OS）是骨组织最常见的原发性恶性肿瘤,进展快,预后差。这主要是因为骨肉瘤恶性程度高,易发生早起转移。目前骨肉瘤精准治疗在于寻找有效的防治靶点。Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rho associated coiled coil forming protein kinase 2,Rock2）是Rho/Rock信号转导通路的关键信号分子,已有研究证明ROCK2对骨肉瘤的增殖有重要作用;IFITM1在多种恶性肿瘤的高表达已被证实与肿瘤增殖相关。我们前期通过基因芯片筛选在骨肉瘤细胞中降低Rock2表达可导致IFITM1表达升高。所以我们推测Rock2在可能通过调控IFITM1的表达从而影响骨肉瘤细胞增殖。本研究拟先通过体外和体内实验明确Rock2调控IFITM1表达对骨肉瘤增殖生物学特性的影响;并进一步探讨Rock2调控IFITM1的分子生物学机制;并检测Rock2和IFITM1在骨肉瘤组织和细胞株中的表达,并分析其与生存时间关联。方法:1、通过荧光定量PCR和Western blot检测多株骨肉瘤细胞株中Rock2和IFITM1的mRNA及蛋白的表达水平。2、在U2-OS、MG-63细胞株中降低骨肉瘤细胞中Rock2的表达,运用荧光定量PCR和Western blot检测细胞中IFITM1 mRNA和蛋白表达变化,同时利用CCK8和EDU实验观察骨肉瘤细胞增殖能力的变化;3、利用稳定转染shRock2-MG-63骨肉瘤细胞株建立人骨肉瘤裸鼠皮下瘤模型,观察荷瘤裸鼠肿瘤的生长情况;4、在骨肉瘤细胞中稳定沉默Rock2的同时过表达IFITM1的表达及在骨肉瘤细胞中过表达Rock2的同时抑制IFITM1的表达,利用CCK8和EDU实验观察骨肉瘤细胞增殖能力;5、利用western blot及荧光定量PCR的方法证实Rock2通过p GSK-3β/β-catenin通路调控IFITM1的表达。6、通过免疫组化方法检测62例骨肉瘤组织Rock2和IFITM1的表达水平,并通过生存曲线分析两者与生存时间的相关性;结果:qRT-PCR和Western blot结果发现在多株骨肉瘤细胞系中Rock2与IFITM1mRNA和蛋白表达水平升高。在U2-OS和MG-63骨肉瘤细胞中转染shRock2及加入Rock2特异性抑制剂（Y27632）后,结果发现IFITM1 mRNA和蛋白降低,同时细胞的增殖能力明显下降（p<0.05）;此外,体内实验证实稳定低表达Rock2组的U2-OS细胞形成的肿瘤较对照组肿瘤体积和重量明显减小（p<0.05）;另外,我们进一步发现升高IFITM1可以逆转沉默Rock2所导致的骨肉瘤增殖能力下降,而降低IFITM1则可以抑制过表达Rock2所导致的骨肉瘤增殖能力增强。3、qRT-PCR和Western blot方法证实在骨肉瘤细胞中Rock2通过p GSK-3β/β-catenin通路调控IFITM1的表达。4、免疫组化结果显示,在骨肉瘤组织中Rock2表达高于正常骨组织（p<0.001）,IFITM1表达高于正常骨组织（p<0.05）。Rock2及IFITM1表达水平与患者生存率呈负相关结论:Rock2可通过GSK-3β/β-catenin途径调控IFITM1并进一步影响骨肉瘤细胞增殖。我们的发现为研究骨肉瘤增殖机制提供了新的理论基础,并将为骨肉瘤的防治靶点提供一个新的研究方向。