水貂肠炎细小病毒（MEV）是细小病毒科，细小病毒属成员，该病毒能够使水貂患上急性、烈性、高度接触性的病毒性肠炎，临床症状主要表现为剧烈腹泻。1949年该病最早由Schofield报道发生于加拿大，1952年Wills从病料中分离得到该病原，并命名为MEV。随后该病传播到美国、丹麦、芬兰、挪威、瑞士、英国和日本。我国有关MEV的最早报道是在1974年。目前，病毒性肠炎己经成为危害水貂养殖的重要疫病之一，给水貂养殖业带来巨大的经济损失。噬菌体随机肽库是将大量随机合成的寡核苷酸片段克隆到噬菌体外壳蛋白基因中，从而把各种随机多肽表达展示于噬菌体的表面的一种工具。噬菌体随机肽库现在已经成为筛选有效的抗病毒多肽的重要分子生物学工具。本实验旨在以纯化的完整病毒粒子为靶分子，用以淘选噬菌体随机肽库，以期获得能够与MEV特异性结合并且能够抑制病毒侵染宿主细胞的多肽，为研制新型的抗病毒制剂或者饲料添加剂奠定基础。本研究从患出血性肠炎的病死水貂中分离鉴定得到一株水貂肠炎细小病毒，经PCR鉴定，病原确定无误。对该病毒的主要衣壳蛋白VP2基因克隆到pMD18-T载体上进行了测序，并且将其与已知的MEV的VP2基因进行了同源率分析和氨基酸突变分析，结果表明该病毒的328位氨基酸残基由疏水性丙氨酸突变为亲水性苏氨酸。构建进化树结果表明，该病毒与近几年在中国流行的MEV毒株亲缘关系较近。随后对该病毒进行了大量培养，通过PEG沉淀的方法对其进行了浓缩和纯化，为噬菌体随机肽库的筛选打下了较好的基础。利用纯化的MEV病毒颗粒对噬菌体随机肽库进行筛选。三轮筛选后，噬菌体出现了明显的富集。利用ELISA对三轮筛选过后随机挑选的30个噬菌体单克隆的亲和力进行了进一步的鉴定，获得了12个高亲和力的噬菌体单克隆。对这12个噬菌体的体外抗病毒能力进行了检测，发现阳性克隆的抗病毒能力及其与MEV的亲和力不呈平行关系。提取这12个噬菌体单克隆的基因组，测序获知其所展示的相应多肽的序列，对多肽的序列进行了同源性分析，利用在线数据库软件预测分析了多肽特性和功能，最终确定序列Pr和Pl作为进一步活性验证的对象。人工化学合成了多肽Pr和Pl，首先测定了其对F81细胞的细胞毒性，确定了其无毒浓度。在无毒浓度的范围下，对多肽的抗病毒能力进行了检测，通过测定病毒的TCID50表明，两个多肽具有很好的抑制病毒繁殖的能力。通过不同时期将多肽和病毒液混合的方法，证明了多肽的作用方式是阻滞病毒与宿主细胞的结合或阻止病毒向宿主细胞内侵入，而对于病毒吸附后的复制过程没有明显的抑制作用。最后对多肽的特异性进行了检测，发现多肽对CPV和FPV亦具有一定的抗病毒作用，但是对CDV却没有抗病毒作用。本研究成功地分离得到一株MEV病毒，并利用噬菌体随机十二肽库技术筛选得到两个多肽，验证了其抗病毒能力和作用方式，为实现利用多肽预防或治疗MEV感染奠定了实验基础。