【摘 要】
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研究目的扩增Sj ARG和Sj p50 IP基因全长的cDNA和DNA序列,分析cDNA和DNA序列之间的不同,扩增ARG基因的启动子序列,实验鉴定ARG基因序列的完整性;研究重组蛋白ARG和p50 IP的生
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研究目的扩增Sj ARG和Sj p50 IP基因全长的cDNA和DNA序列,分析cDNA和DNA序列之间的不同,扩增ARG基因的启动子序列,实验鉴定ARG基因序列的完整性;研究重组蛋白ARG和p50 IP的生物学活性,包括免疫原性、免疫反应性,组织分布及酶活性等;以Sj 26 GST为阳性对照,研究ARG和p50 IP等作为疫苗的保护性效果及可能机制.结论[1]识别并扩增得到了SjARG和Sjp50 IP二个基因的全长DNA和cDNA序列:SjARG基因cDNA序列全长编码区为1164bp,其DNA序列无内含子,其起始密码子前-32位为TATA盒;Sjp50 IP基因cDNA序列全长编码区为1275bp,其DNA编码区序列中有六个内含子,DNA序列全长1486bp.[2]发现纯化的Sj ARG重组蛋白具有与Sj天然蛋白相同的免疫原性和免疫反应性;免疫组化显示ARG定位于日本血吸虫成虫的生殖器、肠管;酶学分析显示,重组ARG具有酶的活性,在37℃、pH9.5时,酶活性单位为35.47 U/mg,Km值为8.465×10-3mol/L;动物免疫效果显示,SjARG具有比GST更好的减虫和减卵效果,特别是SjARG先DNA免疫再蛋白质免疫组,其减虫率、减卵率高达63.9％、97.9%,可能是理想的疫苗候选分子.[3]发现纯化的Sj p50 IP重组蛋白具有与Sj天然蛋白相同的免疫原性和免疫反应性;免疫组化显示p50 IP定位于日本血吸虫成虫的皮层;动物免疫效果显示,p50 IP各组也显示了较高的减虫、减卵效果,其中p50 IP+FKBP12 DNA联合免疫组的减虫率和减卵率最高,分别为58.5%和88.7%,Sj p50 IP/FKBP12可能具有潜在的疫苗研究价值.
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