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目的：本实验应用RNA干扰技术沉默HIF-1α基因，研究其对卵巢癌SKOV3细胞中Topo-Ⅱα表达的影响，为进一步探讨逆转卵巢癌耐药提供理论依据。 方法：根据HIF-1α mRNA序列，体外设计特异性短发卡状RNA插入序列，将其定向克隆入线性化质粒，鉴定插入序列的正确性，构建成HIF-1α-shRNA重组质粒；将卵巢癌SKOV3细胞进行复苏、传代、计数并冻存：将卵巢癌SKOV3细胞分组并分别接种后，用脂质体法将特异性HIF-1α-shRNA重组质粒对SKOV3细胞进行转染，并观察转染效率；应用Western blot法检测HIF-1α沉默的卵巢癌SKOV3细胞中Topo-Ⅱα蛋白的表达情况。 结果：荧光显微镜下观察，阴性对照组及实验转染组细胞转染效率达70％-80％以上：Western blot检测结果显示：实验转染组HIF-1α蛋白量表达明显减低，与空白对照组及阴性对照组相比有差异(P<0.05)；实验转染组Topo-Ⅱα蛋白量表达明显减低，与空白对照组及阴性对照组相比有差异(P<0.05)；空白对照组与阴性对照组相比HIF-1α蛋白量表达无差异(P>0.05)：空白对照组与阴性对照组相比Topo-Ⅱα蛋白量表达无显著差异(P>0.05)。 结论：多药耐药是卵巢癌临床治疗的主要障碍，本实验研究发现shRNA-HIF-1α重组质粒可以有效地抑制卵巢癌细胞中蛋白HIF-1α和蛋白Topo-Ⅱα的表达。通过抑制卵巢癌细中HIF-1α基因的表达，可以使Topo-Ⅱα的表达量减低，这有望为逆转卵巢癌多药耐药提供新策略和新方法。