本研究通过探讨受精卵胞质注射法生产转基因兔的相关影响因素,为建立受精卵胞质注射法生产转基因动物的技术平台奠定基础。　　 一、探讨了家兔体重和不同来源FSH对其超数排卵效果的影响。结果显示,体重超过3kg母兔进行超排,卵巢上的平均排卵点与回收的平均胚胎数(42.06±7.30,40.56±7.2),均显著高于体重2.5kg～3.0kg组(24.13±6.37,25.75±6.50)(P＜0.05)和体重小于2.5kg组(9.71±4.86,8.86±4.56)(P＜0.01);用中国科学院动物所生产的FSH对母兔进行超排处理,卵巢上的平均排卵点和回收的平均胚胎(42.79±8.38,40.63±8.29)显著高于日本进口FSH组(30.35±9.99,29.27±9.62)(P＜0.05),与宁波制品厂的FSH组(21.63±8.34,19.67±8.62)比较差异极显著(P＜0.01)。　　 二、对受精卵胞质注射法生产转基因兔的相关影响因素进行了研究,通过比较兔受精卵胞质注射不同体积和浓度的FAT-1质粒DNA及胚龄对胚胎发育潜力以及转基因效果的影响,以探讨受精卵胞质注射法生产转基因兔的可行性。结果显示:注射FAT-1质粒DNA体积40pL组,其受精卵的卵裂率、桑椹胚率、囊胚率以及囊胚阳性率都显著高于50pL(P＜0.05)和60pL组(P＜0.01),但与对照组相比,受精卵的卵裂率、桑椹胚率和囊胚率差异不显著(P＞0.05);当兔受精卵胞质注射FAT-1质粒DNA浓度为60ng/μL时,囊胚阳性率(64.58％)显著的高于75ng/μL组(28.57％)(P＜0.05),与30、45ng/μL(0和10.20％)比较差异极显著(P＜0.01);供体兔注射HCG后16h回收的兔受精卵进行胞质注射后,囊胚的阳性率(68.63％)显著高于18h组(44.90％)(P＜0.05),极显著高于20h组(9.68％)(P＜0.01);而且16h组的分裂率、桑椹胚率和囊胚率显著高于20h组(P＜0.05)。将受精卵胞质注射法生产的286枚转基因胚胎分别移入11只同期发情的受体母兔,结果有2只受体母兔怀孕。其中一只母兔在妊娠到24天时流产,另外一只母兔怀孕28天后产下2只仔兔,经PCR、RT-PCR、Western blot检测以及冷冻切片观察,证明所生两只仔兔均携带有外源基因。　　 以上结果表明:(1)供体母兔体重和FSH来源均对家兔的超排效果有显著影响,应选用中国科学院动物所的FSH对3kg以上的母兔进行超排处理,以获得理想的超排效果;(2)采用受精卵胞质注射法可成功制备转基因兔;(3)外源基因的浓度和注射的量以及注射的受精卵阶段可影响兔受精卵胞质注射胚胎的发育和转基因效果,选用注射HCG后16h回收的兔受精卵,胞质注射浓度为60ng/μL FAT-1质粒40pL,有利于转基因胚胎的发育并提高转基因的效率。