鲈鱼(Lateolabrax japonicus)CD3基因的克隆及其诱导表达

来源 :宁波大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuyuallen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
CD3分子表达于T细胞表面,并通过非共价键与T细胞受体(T cell receptor,TCR)连接,参与T细胞活化。ZAP-70分子通过 SH2结构域与信号分子结合,影响着 TCR/CD3介导的信号转导途径。研究内容包括:采用反转录 PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术从鲈鱼(Lateolabrax japonicus)肝脏中克隆了CD3γ/δ、CD3ε、CD3ζ和ZAP-70基因cDNA全长;利用qRT-PCR技术检测了鲈鱼CD3基因组织分布及感染哈维氏弧菌后 CD3γ/δ、CD3ε、CD3ζ的表达变化;体外培养鲈鱼头肾白细胞,利用qRT-PCR技术检测了LPS和PHA处理后,白细胞中CD3γ/δ、CD3ε、CD3ζ和ZAP-70基因的表达变化。  本研究主要内容包括:⑴基因序列分析结果显示,CD3γ/δ全长cDNA为1231 bp,包括99 bp的5’非翻译区(untranslated regions,UTR),583 bp的3’UTR和549 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),共编码182个氨基酸;CD3ε全长 cDNA为2145 bp,包括186 bp的5’UTR,1434 bp的3’UTR和525 bp的ORF,共编码174个氨基酸;CD3ζ全长1281 bp,包括56 bp的5’UTR,772 bp的3’UTR和453 bp的ORF,共编码150个氨基酸。ZAP-70 cDNA全长2396 bp,其中5-UTR为127 bp,3-UTR为429 bp,ORF为1830 bp,编码609个氨基酸。氨基酸序列分析发现,CD3γ/δ和CD3ε分子结构相似,均含有1个免疫球蛋白样结构的胞外区、1个跨膜区和含1个ITAM序列的胞浆区,而CD3ζ含有1个仅由5个氨基酸组成的胞外区、1个跨膜区和含3个ITAM序列的胞浆区。ZAP-70分子含有2个SH2结构域和一个SH1结构域,在SH1结构域含有核苷酸结合区域(GxGxxG(x)18K)和该蛋白酪氨酸激酶基序(VHRDLAARNV),及活化环。⑵荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,CD3γ/δ、CD3ε和CD3ζ在鳃、脾、肾、肠中表达较高,在脂肪、肝、眼、脑等组织中表达较少。当腹腔注射哈维氏弧菌3h后,脾组织的CD3γ/δ、CD3ε、CD3ζ基因的表达均显著上调(P<0.05);CD3γ/δ、CD3ε在肠和肾也显著上调(P<0.05);12 h后CD3γ/δ、CD3ε、CD3ζ在鳃、脾、肾、肠中表达均下降并趋于平衡。⑶分离鲈鱼头肾白细胞,用LPS(50 mg/L)和PHA(50 mg/L)处理,孵育3 h后白细胞中 CD3γ/δ、CD3ε显著增加(P<0.05),CD3ζ的表达也高于对照组;6 h后CD3γ/δ、CD3ε和CD3ζ的表达降低;12h后CD3γ/δ、CD3ε表达显著性减少,而CD3ζ的表达趋于平衡。ZAP-70的表达在 LPS刺激后一直降低趋势,当用PHA刺激时,ZAP-70的表达会出现短暂的上升后显著降低(P<0.05)。
其他文献
Outline Background KPAIR-H & control sample Herschel observation & data reduction Photometry & de-blending FIR-submm SED fitting Next step works
会议
和传统的锂离子电池相比,全固态锂离子电池具有很高的安全性能。固体电解质作为全固态锂离子电池的重要组成部分,在全固态电池研究领域受到广泛关注和重点研究。Li2S-P2S5体系玻璃及玻璃陶瓷电解质具有室温锂离子电导率高、电化学稳定性好以及制备工艺简单等优点,有很好的应用前景。本论文以Li2S和P2S5为基本原料,利用高能球磨及热处理的工艺方法制备出了Li2S-P2S5玻璃及玻璃陶瓷电解质。重点研究了L
该文介绍了互联网教育以及计算机辅助有机化学教学在国外和中国的发展历史和形状,并就多媒体技术、INTERNET技术在化学教育领域的应用进行了讨论,介绍了具有文本、图像、动画
该文合成了一系列的芳苷,并对烷基糖苷的合成与工艺条件进行了探索.在芳苷的合成研究中,共合成了经酰基保护的葡萄糖、乳糖、麦牙糖三个系列的芳苷共十七种化合物,讨论了反应
该文主要是通过在30立升聚合装置上改变搅拌的形式、改变搅拌工艺来改善聚氯乙烯树脂的颗粒形态,以提高树脂的表面密度及改善聚氯乙烯树脂的内部形态,从而达到提高聚氯乙烯树