满天星多倍体诱导及其倍性鉴定

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满天星是世界上最重要的切花种类之一,本研究以’千万星’品种组培苗的茎段作为试验材料,以秋水仙素作为诱导试剂,进行多倍体诱导试验,并结合多种鉴定方式对处理后的材料进行倍性鉴定。主要研究结果如下:1.浸泡试验证明试验材料经过在增殖培养基预培养3d后更适合作为诱导材料,后续试验使用预培养3d的茎段作为试验材料。分别用浸泡法、过滤灭菌和高温灭菌培养基添加法三种诱导方式进行’千万星’多倍体诱导试验,同时,设置不同的处理时间和处理浓度,以期找出每种方法的最优组合。结果表明:浸泡法的最优组合为处理时间48h、秋水仙素浓度0.05%,其死亡率为73%、诱导率为13%。过滤灭菌和高温灭菌培养基添加法死亡率较高,较好的组合为过滤灭菌、处理时间15d,秋水仙素浓度0.01%,其死亡率为89%,诱导率为5%。2.对变异植株进行染色体计数,结果表明:对照植株染色体数为2n=2x=34,变异植株染色体数为2n=4x=68。对变异植株组培苗的气孔进行显微镜观察发现:变异植株的保卫细胞宽、保卫细胞长、气孔宽、气孔长和叶绿体数目都显著高于对比对照植株。3.通过观察对比分生区细胞大小和分裂指数,证明’千万星’茎尖比根尖更适合作染色体制片材料。以茎尖为材料,得到优化的满天星染色体制片体系:饱和对二氯苯溶液预处理4h,卡诺氏固定液I固定24h,75%酒精保存(4℃),1mol/L盐酸溶液酸解15min,卡宝品种染色15min。
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