【摘 要】
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目的探寻Liver kinase B1(LKB1)上游调控分子,并研究其对LKB1作用。方法首先,利用UbiBrowser数据库寻找LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Sm
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目的探寻Liver kinase B1(LKB1)上游调控分子,并研究其对LKB1作用。方法首先,利用UbiBrowser数据库寻找LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1过表达质粒,并转染HEK293细胞,通过免疫印迹(WB)检测LKB1蛋白质表达的变化。最后,运用荧光定量PCR(qPCR)、免疫共沉淀(Co-IP)探索Smurf1上调LKB1的分子机制。结果成功构建pCMV5-LKB1、pCMV5-Smurf1的过表达质粒;HEK293细胞中过表达Smurf1蛋白时,显著上调了LKB1的蛋白表达;E3泛素连接酶Smurf1不影响LKB1基因转录,而是通过与LKB1结合并抑制其多聚泛素化降解,进而上调LKB1的表达。结论Smurf1通过降低LKB1的泛素化参与其蛋白稳定性的调节。
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