多氮有机无机杂化材料的抗氧化酶模拟研究

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超氧阴离子(O2-.)和过氧化氢(H2O2)这两种主要的含氧有毒物质易引起食品变质和人体衰老等一系列问题。作为天然的有毒含氧物质清除剂,超氧化物歧化酶(SOD)可以将超氧阴离子转化为氧气和过氧化氢;过氧化氢又可以通过过氧化氢酶(CAT)转化为无毒的氧气和水。因此,具有高效歧化超氧阴离子自由基及分解过氧化氢性能的清除剂在食品、医药、日化等领域具有广泛的应用。但事实上,天然酶不仅提取困难、成本高而且易受环境影响(例如温度、pH等)失去活性,所以在实际应用中受到了很大局限。为了解决上述问题,本工作将具有良好生物相容性的壳聚糖凝胶与具有高活性的配合物交联,得到一系列具有SOD活性的有机无机杂化材料。  本论文主要设计合成五种具有SOD活性的模拟物,并利用红外(IR)、热重(TGA)、X射线光电子能谱(XPS)和电镜扫描(SEM)等测试手段对结果进行了表征。SOD活性测定主要依据四氮唑蓝还原法测定,并依据该方法测试了材料的重复利用性。主要研究工作如下:  (1)设计并合成了四氮大环配合物1,4,7,10-四氮十二杂环-1,4,7,10-四乙酸(DOTA),在与醋酸锰配位后通过酰胺化反应将其与制备的壳聚糖凝胶交联,得到复合材料Chitosan-DOTA-Mn(II)。对其进行SOD活性测试,结果表明其SOD活性IC50=0.001mg/mL。且多次重复利用后,样品仍保有较高的SOD活性。  (2)合成了两种salen型配体,在与锰形成配合物后将其与制备的壳聚糖凝胶交联制备了L1-Chitosan-Mn(Ⅱ)与L2-Chitosan-Mn(Ⅱ)。对两种复合材料进行了SOD活性的测试,结果表明其IC50分别为0.0025mg/mL与0.0034mg/mL。重复利用实验表明在五次重复使用后样品仍有优秀的活性。  (3)合成了两种希夫碱类配体,在与锰形成配合物后将其与制备的壳聚糖凝胶交联制备了L1-壳聚糖-Mn(Ⅱ)与L2-壳聚糖-Mn(Ⅱ)。对两种复合材料进行了SOD活性的测试,结果表明其IC50分别为0.0034mg/mL与0.00615mg/mL。重复利用实验表明在五次重复使用后样品仍有优秀的活性。  为了排除各种因素对测试结果准确度的影响,开展了下列工作:1)测定了在相同实验条件下天然SOD酶的活性数据,以此计算样品的相对活性;2)对各样品溶液在分离样品之后的清液进行了SOD活性测试,以考察由于金属离子的逸出对实验结果的影响;3)考察了未络合金属离子时,样品的SOD活性以佐证吸附因素对测试结果的影响。上述辅助实验为样品SOD活性的评判提供了有力的支持。
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