转ABP9玉米株系的分子鉴定及苗期耐盐性研究

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土壤盐渍化已成为日益严重的世界性生态问题,不仅威胁着人类赖以生存的有限土地资源,还严重制约着农业生产。玉米(Zea mays L.)是世界三大粮食作物之一,在我国国民经济中占有重要地位。然而,玉米耐盐能力较低,因此限制了玉米的种植面积和产量。为改良玉米品种的耐盐性,使其种植范围更广、适应性更强,实验室创制了郑58背景的转ABP9玉米株系。本研究对转ABP9基因玉米植株进行分子鉴定;采用Hoagland营养液水培法,对转ABP9基因玉米及非转基因对照进行NaCl胁迫处理,比较二者在幼苗期的生理指标和基因表达差异,并初步探究其耐盐机制。主要研究结果如下:1.通过PCR检测,Pubi-ABP9和Pabp9-ABP9转基因材料中分别有9个和6个株系被鉴定为转基因阳性株系。qRT-PCR结果显示,转基因阳性株系中ABP9表达量均有增加,其中J8-2和J20-12-3两个过表达株系中ABP9表达量较高。Southern blot和Western blot结果证实,ABP9基因以单拷贝整合到玉米基因组中,并且成功表达。2.采用Hoagland营养液水培法,对转ABP9基因玉米及阴性对照进行一系列盐胁迫实验,结果表明:与阴性对照相比,转基因玉米幼苗盐胁迫下的叶绿素含量、Fv/Fm、渗透调节物质和抗氧化酶活性,以及盐胁迫后恢复过程中的叶片相对含水量均明显提高;而其丙二醛含量、相对电导率和ROS含量均低于阴性对照。综合各项生理指标来看,ABP9过表达确实提高了玉米的耐盐能力。3.转录组测序结果的分析和差异表达基因的发掘,最终筛选得到1075个潜在的受ABP9调控且响应盐胁迫的基因。对部分差异表达基因进行qRT-PCR验证,结果与对测序结果分析中差异表达基因的表达趋势基本一致,说明测序结果数据可靠性较高。GO功能富集分析发现这些基因显著富集在响应非生物胁迫及活性氧清除等生物学过程中。因此,推测这些抗逆相关基因的增强表达很可能是导致转基因玉米植株耐盐性提高的关键。综上所述,导入ABP9基因增强其表达提高了转基因玉米的耐盐能力,为后续研究提供参考和理论依据,为玉米耐盐育种提供新种质。
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