论文部分内容阅读
褐家鼠(Rattus norvegicus)是一种世界性的害鼠,分布于我国湛江和哈尔滨地区的褐家鼠为两个不同的亚种。课题组前期研究表明,哈尔滨地区的褐家鼠在秋冬季繁殖器官受到抑制,而湛江地区的褐家鼠受抑制不明显,并且发现哈尔滨地区的睾丸指数与光照长度呈极显著的正相关,而湛江地区相关性不显著。据此推测,两地褐家鼠繁殖上的差异可能与不同的光周期响应机制有关。因此,本研究以哈尔滨和湛江两地的褐家鼠为研究对象,在2013年和2014年分别在春秋两季进行采样,采用实时荧光定量PCR对繁殖调控光周期响应的关键基因Dio2/Dio3,HPG轴季节繁殖调控的关键基因GnRH、Kiss-1、RFRP-3,以及睾丸减数分裂调控基因和细胞周期标记基因Stra8、GnRHR的表达特征进行了分析。主要结果如下: 1)克隆下丘脑基因片段:Dio2650bp; Dio31047bp; GnRH336bp;RFRP-3349bp;Kiss-1282bp,这些基因片段和GenBank中褐家鼠核苷酸序列相似性达100%。 2)繁殖器官发育在哈尔滨地区秋季受到显著抑制;湛江地区抑制不显著。睾丸GnRHR基因在哈尔滨地区春秋两季差异显著而在湛江地区不显著,并且哈尔滨地区睾丸GnRHR基因表达量在秋季与睾丸指数呈极显著负相关,与秋冬季褐家鼠睾丸发育的分化现象一致。 3) Dio2和GnRH在哈尔滨和湛江两地春季极显著高于秋季;Dio3在两地表现出秋季极显著高于春季;RFRP-3在两地春秋两季表达差异不显著,秋季呈升高趋势;Kiss-1在哈尔滨秋季有升高趋势,在湛江秋季呈下降趋势;Stra82013年在哈尔滨秋季极显著高于春季,在2014则为春季极显著高于秋季,而在湛江差异不显著性。结果表明,光响应基因Dio2/Dio3,GnRH,RFRP-3在哈尔滨和湛江两个褐家鼠种群中的表达模式相似;Kiss-1、Stra8、睾丸GnRHR表达模式在两地存在差异。 综合分析哈尔滨和湛江两地褐家鼠繁殖器官指数及其这些基因表达特征的季节性变化,处于HPG轴上游的光周期信号通路可能不是两地调控睾丸细胞周期停止的直接原因,可能由其他的调控通路基因决定。