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本研究以西南农业大学繁育的高度自交不亲和的甘蓝E1为试验材料,采用PCR、RT-PCR以及3RACE方法克隆了SSP和MLPK基因的核DNA与cDNA序列,并利用生物学软件对其序列进行分析,利用生物信息学方法预测和探讨了蛋白质的结构和功能,以期为芸薹属植物自交不亲和性的分子机理的研究提供新的内容。主要工作与结果如下:
SSP基因的克降与序列分析。以甘蓝的基因组DNA和柱头总RNA为模板,采用3RACE和PCR技术扩增SSP核DNA和cDNA。对目的片段进行回收、克隆并测序。
MLPK基因的克隆与序列分析。以甘蓝的基因组DNA和柱头总RNA为模板,采用RT-PCR和PCR技术扩增MLPKcDNA和核DNA。对目的片段进行回收,克隆并测序。因此,笔者预测,MLPK是芸薹属自交不亲和信号传导途径中SRK下游的一个极重要的因子。